[发明专利]钙网蛋白CALR在猪抗病中的应用

权利要求书

1.一种CALR抑制剂的用途，其特征在于，用来制备抗流行性乙型脑炎的化合物或药物组合物；

其中，所述的流行性乙型脑炎是猪流行性乙型脑炎。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制剂选自下组：靶向CALR蛋白的抗体或小分子抑制剂、CALR基因靶向核酸分子或基因编辑器、或其组合。

3.一种组合物，其特征在于，包括：

(a)基因编辑蛋白或其表达载体，所述基因编辑蛋白选自下组：CasRx、Cpf1、Cas9、Cas13a、Cas13b、Cas13c、或其组合；

(b)gRNA或其表达载体，其中所述gRNA是引导所述基因编辑蛋白特异性结合CALR基因的RNA；和

(c)其他预防和/或治疗流行性乙型脑炎的药物活性成分；

其中，所述的流行性乙型脑炎是猪流行性乙型脑炎。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述组合物的剂型为注射剂型。

5.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述基因编辑蛋白的表达载体和gRNA的表达载体为同一载体或不同载体。

6.一种药盒，其特征在于，包括：

(a1)第一容器，以及位于所述第一容器中的基因编辑蛋白或其表达载体，所述基因编辑蛋白选自下组：CasRx、Cpf1、Cas9、Cas13a、Cas13b、Cas 13c、或其组合；

(b1)第二容器，以及位于所述第二容器中的gRNA或其表达载体，所述gRNA是引导基因编辑蛋白特异性结合于CALR基因的核苷酸序列；和

(c1)第三容器，以及位于所述第三容器中的其他预防和/或治疗流行性乙型脑炎的药物活性成分；

其中，所述的流行性乙型脑炎是猪流行性乙型脑炎。

7.一种如权利要求3所述的组合物或如权利要求6所述的药盒的用途，其特征在于，用于制备(i)用于预防和/或治疗流行性乙型脑炎的药物、或(ii)抑制JEV病毒感染的药物；

其中，所述的流行性乙型脑炎或JEV病毒感染是猪流行性乙型脑炎。

8.一种分离的对JEV病毒感染有抗性的基因工程化细胞的用途，其特征在于，用于制备抗流行性乙型脑炎的化合物或药物组合物，其中所述细胞为体细胞，并且所述细胞中内源性的CALR基因被敲除或敲减，从而使得内源性CALR的表达或活性下降；

其中，所述的流行性乙型脑炎是猪流行性乙型脑炎。

9.一种抗流行性乙型脑炎的培养体系，其特征在于，所述培养体系包括：

(a)JEV病毒；以及

(b)如权利要求8所述的分离的对JEV病毒感染有抗性的基因工程化细胞；

其中，所述JEV病毒感染是猪流行性乙型脑炎。

10.一种抗流行性乙型脑炎的非人哺乳动物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(m1)提供一种非人哺乳动物的细胞，将所述细胞中的CALR蛋白失活，得到CALR蛋白失活的非人哺乳动物细胞；和

(m2)利用步骤(m1)中得到的CALR蛋白失活的细胞，制备得到CALR蛋白失活的抗流行性乙型脑炎的非人哺乳动物；

其中，所述的流行性乙型脑炎是猪流行性乙型脑炎。

11.如权利要求10所述的制备方法，其特征在于，步骤(m1)还包括：筛选CALR位点存在纯合失活的单克隆细胞株。