[发明专利]钙网蛋白CALR在猪抗病中的应用

说明书

本发明提供了一种钙网蛋白(CALR)的应用，用于抑制病毒尤其是日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)在宿主细胞中复制,从而抵抗JEV病毒复制引起的疾病，提供针对流行性乙型脑炎的抗病性。本发明还提供了一种对抗病毒感染的细胞株和一种非人哺乳动物的抗流行性乙型脑炎动物模型及其制备方法。CALR在哺乳动物中高度保守，因此可以广泛应用于人畜共患传染疾病的预防与治疗，同时可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点，减少药物滥用，避免疫情发生，具有丰富的经济价值。

技术领域

本发明涉及动物抗病育种领域，具体涉及钙网蛋白CALR在猪抗病中的应用。

背景技术

流行性乙型脑炎(简称乙脑病)是由日本脑炎病毒(Japanese encephalitisvirus,JEV)感染引起的一种人畜共患病，该病毒又被称为日本脑炎病毒，属于国家二类动物疫病。流行性乙型脑炎是严重危害人畜健康的神经性传染疾病。蚊虫是该种疾病的中间传播媒介，主要通过带毒的蚊虫叮咬患病猪传播疾病，以蚊虫、猪、蚊虫的形式在猪场中广泛传播。因此猪乙型脑炎有着典型的季节性，多发生于蚊虫较多，大量繁殖的夏秋季节，属于自然疫源性疾病。猪场中暴发猪乙型脑炎后，公猪睾丸肿大，精子可带毒通过配种传染；怀孕母猪流产、死胎、木乃伊胎；初生仔猪脑炎、共济失调、发热、死亡。目前该种疾病还没有特效治疗药物，发病后要及时采取措施，需将患病猪扑杀进行无害化处理。尽管乙脑疫苗是预防流行性乙型脑炎的有效措施，但由于JEV感染机制尚不清楚，目前尚无有效的治疗药物，尤其缺乏有效分子靶点。

因此，本领域迫切需要开发一种新的有效调控动物尤其是猪的流行性乙型脑炎抗病性的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的有效调控动物尤其是猪的流行性乙型脑炎抗病性的方法。

本发明的第一方面提供了一种CALR抑制剂的用途，其特征在于，用来制备抗流行性乙型脑炎的化合物或药物组合物。

在另一优选例中，所述抑制剂选自下组：靶向CALR蛋白的抗体或小分子抑制剂、CALR基因靶向核酸分子或基因编辑器、或其组合。

在另一优选例中，所述基因编辑器包括DNA基因编辑器和RNA基因编辑器。

在另一优选例中，所述基因编辑器包括gRNA和基因编辑蛋白。

在另一优选例中，所述gRNA是引导基因编辑蛋白特异性结合CALR基因的RNA。

在另一优选例中，所述gRNA引导基因编辑蛋白特异性结合于CALR基因的核苷酸序列。

在另一优选例中，所述基因编辑蛋白选自下组：CasRx、Cpf1、Cas9、Cas13a、Cas13b、Cas13c、或其组合。

本发明的第二方面提供了一种组合物，其特征在于，包括：

(a)基因编辑蛋白或其表达载体，所述基因编辑蛋白选自下组：CasRx、Cpf1、Cas9、Cas13a、Cas13b、Cas13c、或其组合；和

(b)gRNA或其表达载体，其中所述gRNA是引导所述基因编辑蛋白特异性结合CALR基因的RNA。

在另一优选例中，所述gRNA引导基因编辑蛋白特异性结合于CALR基因的核苷酸序列。

在另一优选例中，所述组合物包括药物组合物。

在另一优选例中，所述组合物还包括：

(c)其他预防和/或治疗流行性乙型脑炎的药物活性成分。

在另一优选例中，所述组分(a)和/或(b)中的所述表达载体包括病毒载体。