[发明专利]心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用在审
申请号: | 201910849453.4 | 申请日: | 2019-09-09 |
公开(公告)号: | CN110433175A | 公开(公告)日: | 2019-11-12 |
发明(设计)人: | 蒲锋星 | 申请(专利权)人: | 陕西佰傲干细胞再生医学有限公司 |
主分类号: | A61K35/16 | 分类号: | A61K35/16;A61P9/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 710024 陕西省西安市灞桥区西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 心梗 血清 大鼠 制备治疗心肌 左心室射血分数 治疗心肌梗死 心室壁厚度 心脏功能 节律性 应用 恢复 | ||
1.心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述心梗条件下的血清外泌体由以下方法制备而成:
S1:心肌梗死模型的建立:选取体重180-200gSD大鼠,用1%戊巴比妥钠进行腹腔注射麻醉;分离组织肌肉,暴露心脏;结扎冠状动脉左前降支;从内向外依次缝合胸腔;超声鉴定心肌梗死模型是否成功造模;
S2:心梗条件下血清样本的制备:对造模成功的SD大鼠进行血液采集;采集的血液进行静置、离心后,收集上层血清样本,冷藏;
S3:心梗条件下血清外泌体的提取:取血清样本适量,从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂A,加入血清样本中,混匀,于4℃静置孵育30min,室温离心去上清,获得沉淀;所述沉淀用适量的灭菌PBS重悬,混匀,获得重悬液;从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂B加入所述重悬液中,混匀,静置孵育30min,室温离心去上清后,获得沉淀物,所述沉淀物用适量的已灭菌的PBS重悬,反复吹打均匀,分装,-80℃保存,获得心梗条件下血清外泌体。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述大鼠心梗模型为心肌梗死模型或者缺血再灌注模型。
4.用于治疗心肌梗死的药物,其特征在于,所述药物包含心梗条件下的血清外泌体,所述心梗条件下的血清外泌体的浓度为80-200μg/100μL。
5.根据权利要求4所述的药物,其特征在于,所述药物由以下方法制备而成:
S1:心肌梗死模型的建立:选取体重180-200gSD大鼠,用1%戊巴比妥钠进行腹腔注射麻醉;分离组织肌肉,暴露心脏;结扎冠状动脉左前降支;从内向外依次缝合胸腔;超声鉴定心肌梗死模型是否成功造模;
S2:心梗条件下血清样本的制备:对造模成功的SD大鼠进行血液采集;采集的血液进行静置、离心后,收集上层血清样本,冷藏;
S3:心梗条件下血清外泌体的提取:取血清样本适量,从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂A,加入血清样本中,混匀,于4℃静置孵育30min,室温离心去上清,获得沉淀;所述沉淀用适量的灭菌PBS重悬,混匀,获得重悬液;从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂B加入所述重悬液中,混匀,静置孵育30min,室温离心去上清后,获得沉淀物,所述沉淀物用适量的已灭菌的PBS重悬,反复吹打均匀,分装,-80℃保存,获得心梗条件下血清外泌体;
S4:取步骤S3中获得的心梗条件下血清外泌体,进行冷冻干燥或加入药学上可接受的溶剂或赋形剂,获得所述药物。
6.根据权利要求4所述的药物,其特征在于,所述溶剂选自纯化水、生理盐水或磷酸缓冲盐溶液中的一种或多种。
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