[发明专利]心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用在审

专利信息
申请号: 201910849453.4 申请日: 2019-09-09
公开(公告)号: CN110433175A 公开(公告)日: 2019-11-12
发明(设计)人: 蒲锋星 申请(专利权)人: 陕西佰傲干细胞再生医学有限公司
主分类号: A61K35/16 分类号: A61K35/16;A61P9/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 710024 陕西省西安市灞桥区西*** 国省代码: 陕西;61
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摘要:
搜索关键词: 心梗 血清 大鼠 制备治疗心肌 左心室射血分数 治疗心肌梗死 心室壁厚度 心脏功能 节律性 应用 恢复
【权利要求书】:

1.心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述心梗条件下的血清外泌体由以下方法制备而成:

S1:心肌梗死模型的建立:选取体重180-200gSD大鼠,用1%戊巴比妥钠进行腹腔注射麻醉;分离组织肌肉,暴露心脏;结扎冠状动脉左前降支;从内向外依次缝合胸腔;超声鉴定心肌梗死模型是否成功造模;

S2:心梗条件下血清样本的制备:对造模成功的SD大鼠进行血液采集;采集的血液进行静置、离心后,收集上层血清样本,冷藏;

S3:心梗条件下血清外泌体的提取:取血清样本适量,从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂A,加入血清样本中,混匀,于4℃静置孵育30min,室温离心去上清,获得沉淀;所述沉淀用适量的灭菌PBS重悬,混匀,获得重悬液;从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂B加入所述重悬液中,混匀,静置孵育30min,室温离心去上清后,获得沉淀物,所述沉淀物用适量的已灭菌的PBS重悬,反复吹打均匀,分装,-80℃保存,获得心梗条件下血清外泌体。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述大鼠心梗模型为心肌梗死模型或者缺血再灌注模型。

4.用于治疗心肌梗死的药物,其特征在于,所述药物包含心梗条件下的血清外泌体,所述心梗条件下的血清外泌体的浓度为80-200μg/100μL。

5.根据权利要求4所述的药物,其特征在于,所述药物由以下方法制备而成:

S1:心肌梗死模型的建立:选取体重180-200gSD大鼠,用1%戊巴比妥钠进行腹腔注射麻醉;分离组织肌肉,暴露心脏;结扎冠状动脉左前降支;从内向外依次缝合胸腔;超声鉴定心肌梗死模型是否成功造模;

S2:心梗条件下血清样本的制备:对造模成功的SD大鼠进行血液采集;采集的血液进行静置、离心后,收集上层血清样本,冷藏;

S3:心梗条件下血清外泌体的提取:取血清样本适量,从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂A,加入血清样本中,混匀,于4℃静置孵育30min,室温离心去上清,获得沉淀;所述沉淀用适量的灭菌PBS重悬,混匀,获得重悬液;从EIQ3-01001试剂盒中拿出试剂B加入所述重悬液中,混匀,静置孵育30min,室温离心去上清后,获得沉淀物,所述沉淀物用适量的已灭菌的PBS重悬,反复吹打均匀,分装,-80℃保存,获得心梗条件下血清外泌体;

S4:取步骤S3中获得的心梗条件下血清外泌体,进行冷冻干燥或加入药学上可接受的溶剂或赋形剂,获得所述药物。

6.根据权利要求4所述的药物,其特征在于,所述溶剂选自纯化水、生理盐水或磷酸缓冲盐溶液中的一种或多种。

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