[发明专利]心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用

说明书

本发明提供一种心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用及用于治疗心肌梗死的药物。本发明提供的含有心梗条件下的血清外泌体的药物能显著提高心梗大鼠的心脏功能；能够恢复心室壁厚度和节律性运动；能够改善心梗大鼠的左心室射血分数；能够显著减少心梗大鼠梗死区域的梗死面积。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用。

背景技术

心肌梗死（Acute myocardial infarction, AMI）是冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死。临床上多有剧烈而持久的胸骨后疼痛，休息及硝酸酯类药物不能完全缓解，伴有血清心肌酶活性增高及进行性心电图变化，可并发心律失常、休克或心力衰竭，常可危及生命。急性心肌梗死是危害人类健康的重大疾病，在发达国家被称为“头号杀手”，是世界范围的主要死亡原因之一。我国近年来，随着经济的迅速发展、生活方式的转变以及人口老龄化的加剧，AMI的发病率和死亡率呈逐年增长趋势，心血管病成为我国疾病死因第一位。根据马尔科夫模型预测，未来20年间中国将新增2100 万急性冠脉事件，发生700万例心源性死亡。AMI 发病率的增加给个人、家庭和社会带来沉重的负担，控制AMI发病率，提高AMI的救治水平，成为心血管领域的一个重要课题。

外泌体(exosome)是由细胞内涵体向外分泌产生的一种微型囊泡，直径在40-100nm之间。微囊泡通过与靶细胞相关受体的相互作用以及蛋白、mRNA、 miRNA、 DNAs、脂质等的传递，在细胞之间信号交流方面扮演了重要的角色。研究发现，外泌体可来自各种类型的细胞，如B细胞、 T细胞、树突状细胞、肿瘤细胞、干细胞、内皮细胞等，并可产生不同的作用，如清除无功能蛋白、抗原呈递、基因交换、血管增生、促进分化、炎症、肿瘤代谢、致病基因或癌基因的传递等。

目前基于外泌体的无细胞替代疗法正在不断兴起，在心血管领域中外泌体也有其独特的疗效，它们能够在急性局部缺血和再灌注模型以及慢性缺血期间保护心脏，在心梗后的疾病转归过程中具有促进血管新生，减轻纤维化，减小梗死面积，抑制凋亡等重要生物学功能，最终可改善心梗预后。它不但具备了干细胞移植疗效，而且减低了细胞移植风险，如免疫排斥反应，致畸致瘤等，因此近年来外泌体在心血管领域得到了广泛的关注和研究，在心梗治疗方面有着广大的应用前景。但现有技术中用于治疗心肌梗死的外泌体主要来源于间充质干细胞，间充质干细胞的培养、诱导和提取费时费力，难以大规模推广；外泌体广泛存在并分布于各种体液中，每微升血清中外泌体数量可达3×10⁶，但体液中外泌体主要来源于机体内大多数细胞，在治疗心肌梗死方面的疗效差强人意，不能满足临床需要。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术存在的问题，提供一种心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用及用于治疗心肌梗死的药物。

为实现本发明的目的，本发明提供以下技术方案：

本发明第一方面提供一种心梗条件下的血清外泌体在制备治疗心肌梗死药物中的应用。

在本发明优选实施例中，所述心梗条件下的血清外泌体由以下方法制备而成：

S1：心肌梗死模型的建立:选取体重180-200gSD大鼠，用1%戊巴比妥钠进行腹腔注射麻醉；分离组织肌肉，暴露心脏；结扎冠状动脉左前降支；从内向外依次缝合胸腔；超声鉴定心肌梗死模型是否成功造模；

S2：心梗条件下血清样本的制备：对造模成功的SD大鼠进行血液采集；采集的血液进行静置、离心后，收集上层血清样本，冷藏；