[发明专利]一种同时测定土壤草甘膦及氨甲基膦酸残余含量的方法

权利要求书

1.一种同时测定土壤草甘膦及氨甲基膦酸残余含量的方法，其特征在于，该方法是在待测土壤样品中加入碱性水溶液提取，提取后在粗提液中加入有机溶剂进行净化处理，而后加入衍生化试剂进行衍生化反应得到待测液，最后采用梯度淋洗-高效液相色谱-荧光检测器法测定草甘膦及氨甲基膦酸衍生物的浓度。

2.根据权利要求1所述的一种同时测定土壤草甘膦及氨甲基膦酸残余含量的方法，其特征在于，所述碱性水溶液为0.03mol/L的磷酸钠水溶液。

3.根据权利要求2所述的一种同时测定土壤草甘膦及氨甲基膦酸残余含量的方法，其特征在于，所述提取的方法为：往土壤样品中加入磷酸钠水溶液，经涡旋混合、超声提取及离心后，获得粗提液；将离心后得到的泥样再按所述提取方法进行二次提取，合并两次粗提液；其中，土壤样品与磷酸钠水溶液的配比为1.00g ：5.00mL，室温下超声提取30min，5000r/min 离心10min。

4.根据权利要求1所述的一种同时测定土壤草甘膦及氨甲基膦酸残余的方法，其特征在于，所述净化处理是将粗提液用1mol/L盐酸调节其pH 至9.0后，再用有机溶剂液液萃取，所述有机溶剂为正己烷。

5.根据权利要求1所述的一种同时测定土壤草甘膦及氨甲基膦酸残余含量的方法，其特征在于，所述衍生化反应是以0.05mol/L 四硼酸钠溶液为缓冲溶液，1g/L氯甲酸-9-芴甲酯(FMOC-Cl)的甲醇溶液为衍生化试剂，在室温避光条件下衍生化反应4h，过0.45μm 水系滤膜得到待测液。

6.根据权利要求1所述的一种同时测定土壤草甘膦及氨甲基膦酸残余含量的方法，其特征在于，采用梯度淋洗-高效液相色谱-荧光检测器法测定草甘膦及氨甲基膦酸衍生物的浓度的方法：

（1）1000 mg/L 草甘膦标准储备液配制：准确称取0.0500g 草甘膦标准品，用超纯水溶解后转移到50mL 棕色容量瓶并定容，获得1000mg/L的草甘膦储备液，于4℃条件下保存；

（2）1000mg/L 氨甲基膦酸标准储备液配制：准确称取0.0500g 氨甲基膦酸标准品，用超纯水溶解后转移到50mL 棕色容量瓶并定容，获得1000mg/L的草甘膦储备液，于4℃条件下保存；

（3）系列标准工作溶液配制：用超纯水按逐级稀释法配置40、80、160、320、400 μg/L系列浓度的标准工作溶液；

（4）衍生化转化：取2mL浓度各为40、80、160、320及400 μg/L的草甘膦及氨甲基膦酸标准混合溶液于4mL PE 管中，加入0.20mL 0.05mol/L 四硼酸钠溶液和0.40mL 1.0 g/L 衍生试剂FMOC-Cl，涡旋使之充分混合，常温下避光衍生反应4h；用2mL 针管抽取衍生后的溶液过0.45 μm 水性滤膜，弃前0.5 mL过滤液，后续滤液接于1.5mL 的棕色色谱瓶中；

（5）荧光检测器-高效液相色谱分析：色谱柱：Inertsil ODS-3 5μm 4.6×250 mmColumn；流动相：0.2%磷酸水溶液，乙腈梯度洗脱；流速：1mL/min；柱温：35℃；进样量：20μl；荧光条件：激发波长260nm，发射波长313nm。