[发明专利]五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法及多指标成分同步含量测定方法有效
申请号: | 201910861833.X | 申请日: | 2019-09-12 |
公开(公告)号: | CN110568099B | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 姜文月;边雨;王宝成;曲佳乐;邢成;王馨笛;肖俊美;梁冰 | 申请(专利权)人: | 吉林省现代中药工程研究中心有限公司;通药制药集团股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34 |
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地址: | 130012 吉林省长*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 五加 参归芪 精制 指纹 图谱 构建 方法 指标 成分 同步 含量 测定 | ||
1.一种五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:取五加参归芪精制剂1~5 mL,加甲醇定容至5~25 mL,超声的功率为140 W,频率为42 kHz,超声时间为10~60 min,滤过,取续滤液,制备供试品溶液;
步骤2:取紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和/或阿魏酸适量,与甲醇混合,制得浓度分别为每1 mL含紫丁香苷50 μg、含毛蕊异黄酮葡萄糖苷30 μg和/或含阿魏酸20 μg的溶液,作为对照品溶液;
步骤3:分别取所述供试品溶液和所述对照品溶液经高效液相色谱法测定,获得五加参归芪精制剂的液相色谱图;所述高效液相色谱测定的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以0.05~0.3%甲酸溶液为流动相B,梯度洗脱,0~20 min,10%A,20~25 min,10%A~15%A,25~45 min,15%A,45~55 min,15%A~25%A,55~65 min,25%A~30%A,65~85 min,30%A~45%A,85~90 min,45%A;检测波长为260 nm,柱温为30 ℃,流速为1.0 mL/min;理论板数按毛蕊异黄酮葡萄糖苷计算应不低于3000;
步骤4:将得到的液相色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统,经多点校正、数据匹配,分析得到五加参归芪精制剂的标准指纹图谱。
2.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述高效液相色谱法的进样量为5~20 μL,所述高效液相色谱法的检测时间不少于90 min。
3.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,测定所得的指纹图谱中有8个共有峰,这些共有特征峰构成了五加参归芪精制剂的指纹图谱,图谱经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件计算,相似度大于0.9,即得五加参归芪精制剂标准指纹图谱。
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