[发明专利]五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法及多指标成分同步含量测定方法

说明书

本发明公开了一种五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法：将五加参归芪精制剂供试品溶液进行高效液相色谱检测，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.05％～0.3％的甲酸水溶液，采用梯度洗脱，该五加参归芪精制剂指纹图谱共有8个特征峰。本发明还公开了五加参归芪精制剂中多指标成分含量测定方法：基于指纹图谱色谱方法，对五加参归芪精制剂中紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸3个化学成分进行同步含量测定。本发明指纹图谱结合多指标成分同步含量测定方法操作简便，专属性强，具有良好的重复性、稳定性，准确度高等优势，能够综合反映五加参归芪精制剂的内在质量，保证产品质量均一性、稳定性、安全性及有效性。

技术领域

本发明涉及五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法，以及多指标成分同步含量测定方法,属于中药质量检测技术领域。

背景技术

中成药是指以中医药理论为指导，以中药材为原料，按规定的处方和工艺加工成一定剂型的、供临床使用的药物，安全、有效、质量可控是中成药质量表征的基本要求。中成药大多为复方制剂，其疗效是多种成分协同作用的结果，具有多组分、多靶点的作用特点。在综合评价中药复方质量与其疗效关系的过程中，色谱指纹图谱的应用已经引起特别关注。中药指纹图谱的来源是由法医学“指纹鉴定”的观念发展而来，是指中药中的多成分应用现代分析手段，以图、表、数据的形式表达的特征性图谱，是一种综合的、可量化的识别模式，具有整体性和模糊性的特点。它的应用控制范围很广，从中药材的种植、饮片的炮制到中成药的生产工艺、成品的质量控制。高效液相色谱(HPLC)技术的广泛使用，使得指纹图谱已成为目前应用最为普遍的化学成分信息表达模式。色谱指纹图谱能反映出中药的化学组成与量的变化，通过指纹图谱的相似度评价能准确的反映出其所含成分的相近性，中药指纹图谱技术作为中成药定性质控方法，可表征样本整体质量。

常规中成药质量控制方法中多采用控制处方君药中的某一种(某类)成分或某一药味(如臣药、佐药)的指标成分，但这种单一指标定量控制很难满足中成药多组分、多靶点的作用特点，不能全面反映其质量状况。而采用多指标成分同步含量测定方法，可实现同一色谱体系多个有效成分的定量监测，则能更精准地表征中成药的质量。

五加参归芪精制剂处方是由刺五加、黄芪、当归3味中药组成，具有扶正固本，补气固表，补血养血等功效。用于久病衰弱，失眠自汗，腰膝酸软，气短心悸。疗效确切，市场认可度高。

本产品质量标准为部版标准中药成方制剂第二册(WS₂-B-0204-90)，标准中只有性状、检查项(pH和相对密度)，无薄层、含量测定项等，标准过于简单。无法有效控制产品的内在质量，为保证产品质量，需要选择合理、必要的控制指标纳入到质量标准中，除了多指标成分定量分析外，还应采用指纹图谱宏观分析的方法，从整体上有效的表征中药质量。

发明内容

本发明目的在于克服现有的五加参归芪精制剂质量标准单一，无定性与定量检测项，不能准确反映产品的质量，而提供了一种五加参归芪精制剂的指纹图谱构建方法，全面表征内在质量。同时文献调研，确定指纹图谱中与药效相关主要指标成分，分别为紫丁香苷、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷，最终建立多成分指标同步含量测定方法，该方法具有专属性强、操作简便等优势，且方法学考察试验结果良好，可作为五加参归芪精制剂的质量控制方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了五加参归芪精制剂指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：

步骤1：取五加参归芪精制剂，制备供试品溶液；

步骤2：取紫丁香苷、阿魏酸和/或毛蕊异黄酮葡萄糖苷获得对照品溶液；

步骤3：分别取所述供试品溶液和所述对照品溶液经高效液相色谱法测定，获得五加参归芪精制剂的液相色谱图；

步骤4：将得到的液相色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，经多点校正、数据匹配，分析得到五加参归芪精制剂的标准指纹图谱。