[发明专利]一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽

说明书

本发明提供一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽，包括以下步骤：将瓜尔豆粕粉碎，得到瓜尔豆粕浆料；向瓜尔豆粕浆料中加入半纤维素酶进行酶解，得到初步酶解液；向初步酶解液中加入中性蛋白酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或几种的混合物进行酶解，得到瓜尔豆粕酶解液；对瓜尔豆粕酶解液进行固液分离，将分离出的液体浓缩、干燥，得到瓜尔活性肽。本发明的使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法以瓜尔豆粕为原料直接提取，无需再提取瓜尔豆蛋白，大大简化工艺，且通过多个酶种的分次、复合酶解获得了优异的活性肽得率。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽。

背景技术

瓜尔豆是印度干旱地区重要的豆科作物，该植物是以其高浓度的半乳糖甘露聚糖为基础生长的，被广泛应用于纺织、造纸、医药、矿业等行业。瓜尔粕是从瓜尔豆中提取的含有皂苷的半乳甘露聚糖的副产品，瓜尔豆粕作为动物饲料营养价值极高，其中含有大量的蛋白质，氨基酸分析表明，瓜尔豆粕中赖氨酸含量为3.22％，胱氨酸含量为0.79％，苏氨酸含量为1.94％，精氨酸含量为3.62％，精氨酸含量为3.7％。亮氨酸，0.73％蛋氨酸，1.51％甲基胱氨酸，色氨酸0.68％，色氨酸2.31％异亮氨酸和2.35％的缬氨酸。但瓜尔豆粕中还存在皂素、甘露聚糖和胰蛋白酶抑制剂等抗营养因素，将瓜尔豆粕直接加入饲料中，会影响肉仔鸡的饲料转化率和生长性能。为此，目前大量研究集中于采用各种加工工艺处理瓜尔豆粕以改善瓜尔豆粕中抗营养因素的抑制生长作用。

功能性蛋白肽又被称为生物活性肽，是指天然氨基酸以不同组成和排列方式构成、分子质量一般小于6000KDa、在构想上比较松散，对生物机体的生命活动有益或具有特定生理作用的多肽或者寡肽类的总称。中国专利文献CN107723328公开了一种瓜尔豆活性肽及其制备方法，通过对瓜尔豆进行处理提取其中的瓜尔活性肽，将提取出的瓜尔活性肽加入饲料中，可避免皂素、甘露聚糖和胰蛋白酶抑制剂等抗营养因素对动物的抑制生长的作用。但该技术中，需要对瓜尔豆粕进行处理，提取其中的瓜尔豆蛋白然后进行瓜尔活性肽的提取，一方面瓜尔蛋白提取方法复杂，不便于工业化生产，另一方面复杂的工艺造成大量的蛋白损失，且活性肽得率低。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法及瓜尔活性肽，使用瓜尔豆粕直接提取，无需再提取瓜尔豆蛋白，且活性肽得率高。

为了解决上述问题，本发明提供一种使用多种酶复合酶解制备瓜尔活性肽的方法，包括以下步骤：

S1.将瓜尔豆粕粉碎，得到瓜尔豆粕浆料；

S2.向步骤S1得到的所述瓜尔豆粕浆料中加入半纤维素酶进行酶解，得到初步酶解液；

S3.向步骤S2得到的所述初步酶解液中加入中性蛋白酶、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或几种的混合物进行酶解，得到瓜尔豆粕酶解液；

S4.对步骤S3得到的所述瓜尔豆粕酶解液进行固液分离，将分离出的液体浓缩、干燥，得到瓜尔活性肽。

其中，瓜尔豆粕是瓜尔豆通过一定的加工工艺提取其中的瓜尔豆胶后的副产品。半纤维素酶指可以将半纤维素分解为小分子多糖或单糖的酶，半纤维素酶可以是甘露聚糖酶、木聚糖酶、葡聚糖酶等；中性蛋白酶指能够在中性或弱酸、弱碱环境中水解蛋白质的肽键，释放氨基酸或多肽的酶，中性蛋白酶根据其作用的活性中心蛋白酶功能基团可分为丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金属蛋白酶，依据其来源可选木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶等；酸性蛋白酶指能够在酸性环境中水解蛋白质的肽键，释放氨基酸或多肽的酶，酸性蛋白酶可选胃蛋白酶等；碱性蛋白酶指能够在碱性环境中水解蛋白质的肽键，释放氨基酸或多肽的酶。