[发明专利]畜禽肉及其制品中脱氢松香酸的检测方法

说明书

本发明公开了一种畜禽肉及其制品中脱氢松香酸的检测方法，该方法采用有机溶剂提取待测样品中的脱氢松香酸，经萃取、过滤后，采用同位素稀释液相色谱‑串联质谱法测定，通过标准工作曲线，实现对畜禽肉及其制品中脱氢松香酸的定性和定量分析。本发明建立了利用液相色谱‑串联质谱法检测脱氢松香酸的方法，克服了现有的外标定量方法基质干扰强、定量准确性不足的缺点，具有干扰少，准确度高、灵敏度高的优点。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，特别涉及一种畜禽肉及其制品中脱氢松香酸的检测方法。

背景技术

工业松香学名松香，是一种化工原料，主要成分为树脂酸，还含有铅等重金属和有毒、有害物质。树脂酸包括松香酸、脱氢松香酸和其它与松香酸互为同分异构体的树脂酸。

大量研究表明，在使用松香脱毛时，松香酸和脱氢松香酸通过畜禽胴体表皮毛孔残留在表皮组织中，并且后续加工方式(腌制蒸煮烘烤等)难以将其有效去除。松香酸和脱氢松香酸及其氧化产物是皮肤接触过敏原，导致人体上皮细胞和成纤维细胞生物活性显著下降，以及人体红细胞和多核性白细胞坏死。而且，使用松香脱毛的家禽还会导致其他有害物质，如铅和毒素进入人体，从而对肝脏和肾脏造成伤害甚至是致癌。因此，松香是国家明令禁止的畜禽脱毛助工剂。

但是，在现阶段我国的食品安全国家监督抽检以及风险监测中均未对畜禽肉及其制品中的非法使用松香进行监测。在现有技术中。通常是通过研究畜禽肉及其制品中松香酸来对松香进行定性和定量的，如发明专利CN 103235079A公开了一种畜禽肉表皮中松香酸含量的分析方法，其采用稀碱溶液提取，固相萃取净化后，用高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)分析；由于液相色谱对松香酸以及与松香酸互为同分异构体的其它树脂酸的分离效果较差，导致该方法所分析的松香酸实际为松香酸、山达海松酸、异海松酸等松香酸同分异构体树脂酸之和，不能准确定性定量；此外该专利采用外标法定量，由于畜禽肉样品中的脂肪干扰物质含量高，导致外标法定量过程中基质干扰强，限制了定量测定的准确性。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种畜禽肉及其制品中脱氢松香酸的检测方法，该方法通过内标法利用同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定脱氢松香酸的含量，从而实现对畜禽表皮中残留的松香进行识别和确证。

为了实现上述目的，本发明具体采用以下技术方案：

一种畜禽肉及其制品中脱氢松香酸的检测方法，包括以下步骤：

S1、称取粉碎后的待测样品，置于离心管中，加入内标工作液和乙腈溶液，超声后离心，取上清液加水混匀，即为净化液；

S2、依次用乙腈、水活化固相萃取柱，取步骤S1所述净化液加入固相萃取柱，用乙腈水溶液淋洗，抽干后，用甲醇溶液洗脱，收集洗脱液并用甲醇定容，涡旋，经滤膜过滤后的滤液为待测液；

S3、配制系列含有同位素内标的脱氢松香酸标准工作溶液，采用同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定标准工作溶液，得到标准工作曲线；

S4、采用与步骤S3相同的方法测量步骤S2所述待测液，并根据标准工作曲线计算得到待测液中脱氢松香酸的含量。

优选的，步骤S1所述内标工作液为脱氢松香酸-6,6-D₂甲醇溶液。

优选的，步骤S2所述固相萃取柱的规格为200mg/mL。

优选的，所述系列标准工作溶液的配制方法为：先分别配制1mg/mL脱氢松香酸标准储备液和1mg/mL同位素内标储备液，再分别稀释成10μg/mL的标准中间液和为20μg/mL的内标中间液，最后分别准确吸取标准中间液适量，加入50μL内标工作液，用甲醇溶液稀释成5～400ng/mL系列标准工作溶液。

优选的，步骤S3所述标准工作溶液的检测方法具体为：