[发明专利]一种去除真菌中细菌污染的方法在审
| 申请号： | 201910871994.7 | 申请日： | 2019-09-16 |
| 公开（公告）号： | CN110699260A | 公开（公告）日： | 2020-01-17 |
| 发明（设计）人： | 王教瑜;邱海萍;施笑笑;柴荣耀;张震;毛雪琴;王艳丽;孙国昌 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N1/02;C12R1/77;C12R1/645 |
| 代理公司： | 33246 浙江千克知识产权代理有限公司 | 代理人： | 黎双华;李欣玮 |
| 地址： | 310000 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 培养基 盖玻片 真菌培养基 小孔 切割 恒温恒湿培养箱 培养基平板 无菌培养皿 高温灭菌 实验周期 细菌去除 细菌污染 真菌菌落 真菌菌丝 真菌 玻片 放入 轻压 取盖 无菌 去除 工作量 接种 凝固 反弹 保证 | ||
1.一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将备好的真菌培养基高温灭菌后倒入无菌培养皿中，带培养基凝固后，在培养基平板上切割出一个以上小孔；
(2)挑取合适大小的样品置于切割出的小孔内；
(3)盖上无菌盖玻片，轻压盖玻片四周使其与培养基紧密接触，保证培养基和盖玻片之间不留有气泡；
(4)将步骤(3)得到的培养基放入恒温恒湿培养箱中培养；
(5)挑取盖玻片周围新长出的真菌菌丝，重新接种到新的真菌培养基上培养得到真菌菌落。
2.根据权利要求1所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述真菌包括稻瘟病菌、赤霉病菌、炭疽病菌、纹枯病菌(Rhizoctonia solani)或葡萄溃疡病病菌。
3.根据权利要求2所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述稻瘟病菌包括Guy-11、70-15、2539或TH3。
4.根据权利要求1所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述细菌包括大肠杆菌、农杆菌或芽孢杆菌。
5.根据权利要求1所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述真菌培养基包括CM培养基、PDA培养基、MEA培养基或OA培养基。
6.根据权利要求1所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述小孔是直径为3-5mm的圆形小孔或者边长为3-5mm的方形小孔。
7.根据权利要求1所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，切割小孔的工具包括无菌牙签或打孔器。
8.根据权利要求1所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述步骤(4)培养温度为25-28℃，培养湿度为30％-70％。
9.根据权利要求1所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述步骤(4)培养天数根据真菌生长情况而定。
10.根据权利要求9所述的一种去除真菌中细菌污染的方法，其特征在于，所述培养天数为7-10天。
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