[发明专利]利用超高效液相色谱-质谱联用检测白芍饮片中黄曲霉毒素G2;G1;B2;B1的方法

说明书

本发明公开了一种超高效液相色谱‑质谱联用检测白芍饮片中黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1的方法，包括：制备供试品溶液、对照品储备溶液和基质标准曲线溶液；然后上机分析，色谱柱采用C18色谱柱；流动相A为体积比1:1的乙腈‑甲醇的混合溶液，流动相B为0.01moL/L乙酸铵水溶液，采用梯度洗脱；采用质谱检测器，ESI离子源，进行多反应监测；运用浓度与响应值进行线性定量。本发明的方法具有定性精准、灵敏度高、精密度高、线性拟合度高的优点。

技术领域

本发明属于化学分析及检测领域，具体涉及一种利用超高效液相色谱-质谱联用技术检测白芍饮片中黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1的方法。

背景技术

黄曲霉毒素是真菌产生的有毒次生代谢产物，种类繁多，广泛污染农作物、食品及饲料等，严重威胁着人类健康，是一类毒性极强的剧毒物质，主要包括黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2，其中以黄曲霉毒素B1的毒性最强。1993年，黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡。

中药及其相关产品在生产、加工、运输、贮存过程中，很容易发生霉变而污染各种真菌，产生对人体有害的真菌毒素，中药真菌毒素污染问题也引起了业内人士的重视。为加强中药材的质量控制，国家食品药品监督管理局增加了中药材的安全性指标控制项目，尤其是加强对中药材中重金属及有害元素、黄曲霉毒素、农药残留量的控制。《中国药典》对部分中药材的规定限度为黄曲霉毒素B1不得过5μg/kg；黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2总量不得过10μg/kg；但对白芍饮片并未提及是否需要测试黄曲霉毒素。

无论从保障白芍饮片产品的安全性方面，还是从中药材的质量控制日益严格的趋势方面，均有必要建立一个针对白芍饮片中黄曲霉毒素进行检测的方法，以进一步完善白芍饮片产品的质量管理规范。

发明内容

本发明所要解决的问题在于，为白芍饮片提供一种同时检测黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1的检测方法，该方法具有线性拟合度高、灵敏度高、准确度和精密度高的优点。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：

一种利用超高效液相色谱-质谱联用技术检测白芍中黄曲霉毒素G2,G1,B2,B1的方法，包括下列步骤：

(1)供试品溶液的制备：取白芍饮片粉碎后的粉末适量，经提取、免疫亲合柱洗脱纯化、稀释并定容，得供试品溶液；以粉末质量计，所述供试品溶液浓度为0.01～1g/ml；

混合对照品储备溶液的制备：分别取黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1四种对照品适量，配置成含有黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的混合照品储备溶液；所述混合对照品储备溶液中，黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的浓度分别独立的为0.01～10μg/mL；

基质标准曲线溶液的制备：取适量白芍饮片粉碎后的粉末至少五份，按一定梯度分别加入不同体积的混合对照品储备溶液，然后按照所述供试品溶液的制备相同的方法，配制得到具有一定浓度梯度的至少五个基质标准曲线溶液；

(2)上机分析，按以下色谱条件和质谱条件进行检测；

色谱条件为：色谱柱为Poroshell 120EC C18 1.9μm 2.1×100mm；流动相包括流动相A和流动相B；流动相A为体积比1:(0.9～1.1)的乙腈-甲醇的混合溶液；流动相B为0.005～0.02moL/L乙酸铵水溶液；采用梯度洗脱：流动相A+流动相B＝100％；0-4.0min，流动相A保持体积百分比为40％；4.0-4.1min，流动相A体积百分比由40％递增至90％；4.1-7.0min，流动相A保持体积百分比为90％；