[发明专利]一种彗星实验中的换液方法

权利要求书

1.一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、第一层胶的制备，将做好标记的载玻片放在50℃的干浴锅上1-3分钟后，取煮沸后冷却的试剂M 200ul滴在同样预热的载玻片的磨砂面，迅速盖上干净的盖玻片，制成滴片，将准备好的滴片放在4℃的环境中，放置至少30min使其凝固；

S2、之后再制备第二层胶，从4℃环境中拿出滴片，轻揭去盖玻片，形成胶板，放在37℃干浴锅上1-3分钟后，将已经消化后得到的细胞悬液与37℃中的试剂N混合，均匀滴加胶板上，迅速盖上干净的盖玻片，将准备好的滴片放在4℃的环境中，放置至少30min使其凝固；

S3、移除盖玻片，将载玻片放在试剂盒中，并对载玻片进行固定，用PWM芯片调节泵进不同的液体，从而实现换液这一步操作，通过旋转PWM调节芯片调节泵的开关，从而实现液体的上样流速。

2.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，PWM调节芯片调节泵包括PWM调节芯片和浇花泵以及连接管。

3.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于,在没有引入PWM调节芯片调节泵时，试剂N在操作中20s就凝固了，在引入PWM调节芯片调节泵时，试剂N在37℃上面1min后胶还没未凝固。

4.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，第一层胶的覆盖面大于第二层胶的覆盖面。

5.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，试剂M由琼脂与无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS组成，试剂M配置方法包括以下步骤：

A1、称量0.8g琼脂糖溶于100ml的无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS中，微波炉加热煮沸；

A2、将煮沸的试剂放在室温冷却待用。

6.根据权利要求1所述的一种彗星实验中的换液方法，其特征在于，试剂N由琼脂与无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS组成,试剂N配置方法包括以下步骤：

B1、称量0.6g琼脂糖溶于100ml的无Ca2+、Mg2+的磷酸缓冲液PBS中，微波炉加热煮沸；

B2、将煮沸的试剂放在37℃水浴锅中待用。

B3、取400ul试剂N于干净的1.5mlEP管中，将EP管放在37℃干浴锅上待用。