[发明专利]一种通过电化学双酶传感器检测毛油中PC含量的方法

权利要求书

1.一种通过电化学电化学双酶传感器检测毛油中PC含量的方法，其特征在于采用电化学双酶传感器对毛油中的PC进行检测的方法通过以下步骤实现：

具体实施方式一：

用自制的电化学双酶传感器检测毛油中PC含量的方法通过以下步骤实现：步骤一：自制的电化学双酶传感器。取0.15g壳聚糖(CS)粉末置于250mL的烧瓶中，加入浓度为0.3％的CS/乙酸透明溶液，用电动搅拌器搅拌30min，促使CS的充分溶解。2.5mg二氧化锡(SnO₂)和5mg多壁碳纳米管(MWCNTs)粉的混合物，加入到5mL的CS/乙酸透明溶液中，超声处理60min，得到MWCNTs-SnO₂-CS纳米复合物，于4℃贮存备用；步骤二：制备含有100mg·L-1PC的PBS缓冲溶液为测试底液。将2.5U辣根过氧化物酶溶液滴涂到GCE表面，置于4℃下静置干燥，待表面成薄膜状时滴加5μL戊二醛于电极表面，37℃下交联30min，然后用PBS缓冲液清洗电极表面。GCE上滴加10μL胆碱氧化酶，待表面成薄膜状时滴加5μL戊二醛于电极表面，37℃下交联30min，然后利用PBS缓冲液清洗电极的表面，N₂吹干后得到双酶GCE，将其储存在4℃干燥的环境下备用；步骤三：在测试底液中，PC经PLD处理一段时间后获得胆碱，胆碱在ChOx催化作用下生成H₂O₂，H₂O₂再被固定的HRP还原，进而氧化态的HRP与溶液中电子媒介体硫堇之间发生电子转移，最终TH+在电极表面得到电子被还原，从而产生了还原电流，说明了双酶GCE对PC具有明显的电化学响应效果。

2.根据权利要求1所述的一种通过电化学双酶传感器检测毛油中PC含量的方法，其特征在于步骤二中CS/乙酸透明溶液的浓度为1％。

3.根据权利要求1所述的一种通过电化学双酶传感器检测毛油中PC含量的方法，其特征在于步骤二中交联的温度为25℃。

4.根据权利要求1所述的一种通过电化学双酶传感器检测毛油中PC含量的方法，其特征在于步骤二中电化学交联时间为60min。