[发明专利]一种骨再生材料的制备方法

权利要求书

1.一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：将壳聚糖和聚氧化乙烯完全溶解于乙酸溶液，搅拌均匀，得到纺丝液；

S2：采用步骤S1制备得到的纺丝液进行静电纺丝，得到壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维；

S3：将步骤S2制备得到的壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维用DMEM培养基洗涤至中性，烘干之后经等离子处理体处理活化得到活化纳米纤维；

S4：将步骤S3制备得到的活化纳米纤维以1:100～300的浴比浸泡在含有重组骨生长因子和表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体的DMEM培养基中以真空度为0.100～0.024mBar进行负压闪爆，然后进行接枝反应，得接枝纳米纤维，其中，所述表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体包括亲水内核层和外部磷脂双分子层，所述亲水内核层载有表没食子儿茶素没食子酸酯，所述外部磷脂双分子层载有类胡萝卜素；

S5：将步骤S4制备得到的接枝纳米纤维离心、冻干，得骨再生材料。

2.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述壳聚糖的粘均分子量为5.0×10⁵，脱乙酰度为80～85％；所述聚氧化乙烯的平均分子量为1.0×10⁶；所述乙酸溶液的浓度为90v/v％。

3.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，所述纺丝液中壳聚糖和聚氧化乙烯的总浓度为10～30g/L，其中，壳聚糖与聚氧化乙烯的质量比为1:1～4。

4.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述烘干的温度为37～45℃，烘干时间为2～4h。

5.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述等离子体处理的条件为：气体采用氮气或氧气，处理功率为250～300W，压强50～60Pa，处理时间为10～15min。

6.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述类胡萝卜素为虾青素、番茄红素中的一种。

7.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述重组骨生长因子包括血小板源生长因子和骨形成蛋白2，所述含有重组骨生长因子和表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体的DMEM培养基中血小板源生长因子的浓度为40～80mg/L，骨形成蛋白2的浓度为20～40mg/L。

8.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述含有重组骨生长因子和表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体的DMEM培养基中表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度为50～200mg/L，类胡萝卜素浓度为200～500mg/L。

9.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述接枝反应的反应温度为0～4℃，反应时间为12～24h。

10.根据权利要求1所述的一种骨再生材料的制备方法，其特征在于，步骤S5中，所述离心的重力加速度为10000g，时间10min；所述冻干的温度为-30～-20℃，真空度为0.100～0.024mBar，冻干时间为3～5d。