[发明专利]一种骨再生材料的制备方法

说明书

本发明属于生物医学工程领域，公开了一种骨再生材料的制备方法，包括(1)将壳聚糖和聚氧化乙烯完全溶解于90v/v％乙酸溶液，搅拌均匀，得到纺丝液；(2)采用纺丝液进行静电纺丝，得到壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维；(3)将壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维用DMEM培养基洗涤至中性，烘干之后经等离子处理器处理活化；(4)活化的纳米纤维浸泡在含有骨生长因子和表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体的DMEM培养基中进行负压闪爆，之后进行接枝反应，离心冻干。本发明制备方法得到的骨再生材料，能有效提高骨生长愈合速度。

技术领域

本发明涉及生物医学工程领域，具体涉及一种骨再生材料的制备方法。

背景技术

血小板源生长因子(PDGF)和骨形成蛋白2(BMP-2)是最重要的两种骨生长因子。作为自然伤口愈合反应的一部分，PDGF是骨损伤(例如骨折)后第一个立即释放的因子。在PDGF出现后，其他因子，包括BMP-2，通过招募产骨细胞并形成一种支撑结构(包括血管)，帮助形成骨再生所需的合适环境。现有技术中，无法以一种受控的方式有效传递这些生长因子，因此用它们治疗骨损伤的研究已经受到阻碍。当非常大数量的生长因子传递太快时，它们就被从治疗部位迅速清除，因此它们对组织修复的作用减小，也可能引起有害的副作用。所以，理想的生长因子需要在数天或数周时间内，被缓慢地释放或者在病灶处持续作用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种骨再生材料的制备方法，本发明制备的骨再生材料可以缓慢地释放血小板源生长因子(PDGF)和骨形成蛋白2(BMP-2)等骨生长因子，具有更好地骨生长修复效果。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种骨再生材料的制备方法，包括如下步骤：

S1：将壳聚糖和聚氧化乙烯完全溶解于乙酸溶液，搅拌均匀，得到纺丝液；

S2：采用所述纺丝液进行静电纺丝，得到壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维；

S3：将所述壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维用DMEM培养基洗涤至中性，烘干之后经等离子处理体处理活化得到活化纳米纤维；

S4：将所述活化纳米纤维以1:100～300的浴比浸泡在含有重组骨生长因子和表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体的DMEM培养基中以真空度为0.100～0.024mBar进行负压闪爆，然后进行接枝反应，得接枝纳米纤维，其中，所述表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体包括亲水内核层和外部磷脂双分子层，所述亲水内核层载有表没食子儿茶素没食子酸酯，所述外部磷脂双分子层载有类胡萝卜素；

S5：将所述接枝纳米纤维离心、冻干，得骨再生材料。

优选的，步骤S1中，所述壳聚糖的粘均分子量为5.0×10⁵，脱乙酰度为80～85％；所述聚氧化乙烯的平均分子量为1.0×10⁶；所述乙酸溶液的浓度为90v/v％。

优选的，所述纺丝液中壳聚糖和聚氧化乙烯的总浓度为10～30g/L，其中，壳聚糖与聚氧化乙烯的质量比为1:1～4。

优选的，步骤S3中，所述烘干的温度为37～45℃，烘干时间为2～4h。

优选的，步骤S3中，所述等离子体处理的条件为：气体采用氮气或氧气，处理功率为250～300W，压强50～60Pa，处理时间为10～15min。

优选的，步骤S4中所述类胡萝卜素为虾青素、番茄红素中的一种。

优选的，步骤S4中，所述重组骨生长因子包括血小板源生长因子和骨形成蛋白2，所述含有重组骨生长因子和表没食子儿茶素没食子酸酯/类胡萝卜素脂质体的DMEM培养基中血小板源生长因子的浓度为40～80mg/L，骨形成蛋白2的浓度为20～40mg/L。