[发明专利]一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法

权利要求书

1.一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：将一定量O-羧甲基壳聚糖和聚氧化乙烯完全溶解于90v/v%乙酸溶液，搅拌均匀，得到纺丝液；其中，O-羧甲基壳聚糖和聚氧化乙烯的总浓度为10~30 g/L，O-羧甲基壳聚糖与聚氧化乙烯的质量比为1:1~4；

S2：采用所述纺丝液进行静电纺丝，得到O-羧甲基壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维；

S3：将所述O-羧甲基壳聚糖/聚氧化乙烯纳米纤维用DMEM培养基洗涤至中性，烘干之后经等离子处理器处理活化，得活化纳米纤维；

S4：将步骤S3得到的活化纳米纤维浸泡在含有重组表皮生长因子和CoCl₂的DMEM培养基中进行负压闪爆，之后进行接枝反应，离心冻干后得到表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维；其中，所述含有重组表皮生长因子和CoCl₂的DMEM培养基中重组表皮生长因子的浓度为40~80mg/L，CoCl₂的浓度为0.15~0.30g/L。

2.根据权利要求1所述的一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述O-羧甲基壳聚糖粘均分子量为5.0×10⁵，脱乙酰度为80~85%，所述聚氧化乙烯的平均分子量为1.0×10⁶。

3.根据权利要求1所述的一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述静电纺丝工艺中，注射器规格为10mL，针头规格为平头，7号针，电压12~20kV，距离7~10cm，进样速率0.3~1.0mL/h，温度25~35℃。

4.根据权利要求1所述的一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述烘干的温度为37~45℃，烘干时间为2~4h。

5.根据权利要求1所述的一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法，其特征在于，步骤S3中，等离子体处理器处理的条件为：气体采用氮气或氧气，处理功率为250~300W，压强50~60Pa，处理时间为10~15min。

6.根据权利要求1所述的一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法，其特征在于，步骤S4中，接枝反应的浸泡浴比为1:100~300，浸泡温度为0~4℃，浸泡时间为12~24h。

7.根据权利要求1所述的一种表面接枝重组表皮生长因子纳米纤维的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述负压闪爆的真空度为0.100~0.024mBar，所述冻干的温度为-30~-20℃，真空度为0.100~0.024mBar，冻干时间为3~5d。