[发明专利]一种叶绿体DNA的富集方法

权利要求书

1.一种叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，包括：

(1)提取植物基因组DNA；

(2)使蛋白A修饰的磁珠与MBD2-Fc蛋白结合，得到处理后的磁珠；

(3)将所述植物基因组DNA加入所述处理后的磁珠中，混匀，对混合物进行室温下孵育；

(4)对孵育后的混合物离心，于磁力架上静置，细胞核DNA通过与磁珠上的MBD2-Fc蛋白结合而附着到磁珠上，叶绿体DNA保留在上清液中，取上清液；

(5)使用磁珠对所述上清液中的叶绿体DNA进行回收，即得到富集后的叶绿体DNA。

2.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(1)中，在提取植物基因组DNA时，保证所述植物基因组DNA的完整性，并且完全去除植物蛋白。

3.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(1)中，提取植物基因组DNA的方法为：对待提取样本使用蛋白酶K处理，然后用酚氯仿或酒精提取。

4.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(1)中，还包括对提取的植物基因组DNA进行质量检测的步骤和/或对提取的植物基因组DNA进行纯化的步骤。

5.根据权利要求4所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，所述对提取的植物基因组DNA进行质量检测的步骤包括浓度检测、有无降解检测、杂质检测中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(2)中，所述蛋白A为从A型金黄色葡萄球菌分离得到的细胞壁蛋白。

7.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(2)中，使蛋白A修饰的磁珠与MBD2-Fc蛋白结合的方法为：取蛋白A修饰的磁珠与MBD2-Fc蛋白混合，室温中孵育10～15分钟。

8.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(2)中还包括除去未结合的MBD2-Fc蛋白的步骤。

9.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(3)中，加入到所述处理后的磁珠中的植物基因组DNA的总量不超过1μg。

10.根据权利要求1所述的叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，步骤(3)中，所述室温下孵育的时间为15～20分钟。