[发明专利]一种从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法

权利要求书

1.一种从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.预处理

取新鲜火龙果茎洗净，去皮，切块；然后按料液比1:6～10加入护色水溶液进行护色30min～60min，所述护色水溶液为含有质量分数为0.02％～0.1％D-抗坏血酸钠和0.1％～0.5％柠檬酸的水溶液；最后放入搅拌机中搅拌至糊状得火龙果茎浆料，置于4℃条件下保存；

S2.多糖提取

S21.粗多糖一提：

采用超高压辅助热水浸提法提取，将所述火龙果茎浆料加入超高压提取设备中，按料液比1:10～20加入水，加压并保持压力，然后泄压，过滤，将得到的滤液进行冷藏并进行第一次离心分离，收集上清液再次冷藏，进行第二次离心分离，收集上清液得到一提提取液；

S22.粗多糖二提：

将步骤S21中过滤得到的滤渣进行二次提取，按料液比1:6～10向所述滤渣加入水，然后按照所述滤渣质量百分比加入5％复合酶，调节pH值到4～5，在45～55℃下恒温搅拌3～5h；最后灭酶，过滤取滤液得到二提提取液；

所述复合酶包括果胶酶和蛋白酶；

S23.粗多糖醇沉与干燥：

将所述一提提取液和二提提取液合并，浓缩至原体积的1/4，按体积比1:3～5加入体积分数95％的乙醇并在冰水中放置20～30h进行醇沉，过滤取沉淀；最后将所得沉淀放入超声辅助真空冷冻干燥机冷冻干燥，即得火龙果茎粗多糖；

S3.多糖脱蛋白

将所述火龙果茎粗多糖溶解，加入质量比0.1％～0.3％的木瓜蛋白酶，调pH值到6～7，60℃恒温1～3h，最后灭酶，过滤取滤液，得到火龙果茎多糖脱蛋白滤液；

S4.多糖脱色

向所述火龙果茎多糖脱蛋白滤液中加入质量比1％～3％的活性炭，在55～65℃温度下搅拌20～40min后静置5～20min，过滤取滤液，得到火龙果茎多糖脱色滤液；

S5.多糖脱小分子杂质

利用反渗透膜除去所述火龙果茎多糖脱色滤液中的小分子杂质,得到火龙果茎多糖浓缩液；

S6.纯化多糖醇沉与干燥

按体积1：3～5比例向所述火龙果茎多糖浓缩液加入体积分数95％乙醇并在冰水中放置20～30h进行醇沉，过滤取沉淀；最后将所得沉淀用超声辅助真空冷冻干燥机冷冻干燥，即得火龙果茎多糖纯品；

S7.甘露低聚糖制备

按料液比1:15～25向火龙果茎多糖纯品加入水，煮沸，冷却至室温；然后，调节pH值至6.0，加入质量比2.5％的β-甘露聚糖酶，在45～55℃下水解20～30h；最后灭酶，过滤得滤液；将所述滤液采用10～100nm超滤膜循环过滤，得甘露低聚糖溶液；

S8.甘露糖转化

按质量比向所述甘露低聚糖溶液中加入0.05％葡萄糖异构酶和甘露糖异构酶的混合物进行反应；反应结束后采用截留分子量150～200kD的纳滤膜浓缩处理，得甘露糖溶液；

S9.高纯度甘露糖制备

将所述甘露糖溶液真空浓缩至糖浆浓度为85wt％，加入浓缩液体积2倍的无水乙醇和质量比1％D-甘露糖的晶种，结晶，析晶，过滤，干燥得到高纯度的D-甘露糖。

2.根据权利要求1所述的从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法，其特征在于，步骤S21中，所述超高压辅助热水浸提法，加压压力为300～500Mpa，温度为120～140℃，压力保持时间为15～30min。

3.根据权利要求1所述的从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法的制备方法，其特征在于，步骤S21中，第一次冷藏温度为1～3℃，冷藏时间为3～5h；再次冷藏温度为2～5℃，冷藏时间为1～2h；第一次离心分离的转速为4000～5000r/min，分离时间为10～20min；第二次离心分离的转速为5000～6000r/min，分离时间为5～10min。

4.根据权利要求1所述的从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法，其特征在于，步骤S22中，果胶酶和蛋白酶的质量比为1:1～2。

5.根据权利要求1所述的从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法，其特征在于，步骤S5中，操作压力为3MPa，浓缩倍数为20～30倍。