[发明专利]一种复合干细胞生物制剂

权利要求书

1.一种复合干细胞生物制剂，其特征在于，包括脂肪干细胞，胡萝卜苷，葛根素，β-谷甾醇，溶剂。

2.根据权利要求1所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述脂肪干细胞为1×10⁷-5×10⁷个/mL，胡萝卜苷为5-10μg/mL，葛根素为5-10μg/mL，β-谷甾醇为4-6μg/mL。

3.根据权利要求1或2所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，还包括细胞保护剂，所述细胞保护剂为海藻糖、人血白蛋白或两者的混合物；优选地，所述细胞保护剂为30-50μg/mL。

4.根据权利要求1-3任一项所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述溶剂为PBS溶液或者生理盐水。

5.根据权利要求1-4任一项所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述复合干细胞生物制剂的制备方法包括下述步骤：

S1、从脂肪组织中分离、培养脂肪干细胞；

S2、将得到的脂肪干细胞进行表型检测；

S3、将表型检测合格的脂肪干细胞用溶剂重悬，然后加入其余原料，配制得到复合干细胞生物制剂。

6.根据权利要求5所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述复合干细胞生物制剂的制备方法还包括将培养得到的脂肪干细胞进行低氧预处理。

7.根据权利要求6所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述低氧预处理的培养条件具体为：1％O₂，5％CO₂,94％N₂，37℃。

8.根据权利要求6或7所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述低氧预处理方法具体为：将传代培养得到的脂肪干细胞用胰酶溶液消化，然后接种到无血清培养基中，先在5％CO₂,37℃常氧培养2-3d，然后更换新鲜培养基，在1％O₂，5％CO₂,94％N₂，37℃条件下低氧培养1-2d。

9.根据权利要求5-8任一项所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述步骤S1中，脂肪干细胞的分离、培养方法具体为：取脂肪组织，用0.2-0.3％的胶原酶溶液消化后，接种到无血清培养基中培养，2-3d后更换新鲜培养基，以后每1-2d更换一次，待细胞融合达到80-90％后传代。

10.根据权利要求5-9任一项所述的复合干细胞生物制剂，其特征在于，所述步骤S3中，表型检测合格具体指：CD31、CD34和CD45＜1％，CD29、CD73、CD90＞95％。