[发明专利]一种复合干细胞生物制剂

说明书

本发明公开了一种复合干细胞生物制剂，包括脂肪干细胞，胡萝卜苷，葛根素，β‑谷甾醇，溶剂。所述脂肪干细胞为1×10⁷‑5×10⁷个/mL，胡萝卜苷为5‑10μg/mL，葛根素为5‑10μg/mL，β‑谷甾醇为4‑6μg/mL。本发明的复合干细胞生物制剂原料来源广泛、应用方便，而且能有效加快皮肤创面的愈合速度，促进皮肤的修复再生。

技术领域

本发明涉及生物制剂技术领域，尤其涉及一种复合干细胞生物制剂。

背景技术

伤口愈合是机体对所形成缺损进行修补恢复的复杂过程，包括凝血、炎症发生、血管新生、纤维组织形成、胞外基质沉积、瘢痕组织形成和上皮组织再生等阶段。难愈性创面会导致皮肤功能的丧失，给人们的日常生活带来极大的痛苦，也是目前治疗的难题。干细胞能通过分化为组织相关细胞、参与新生组织构建以及改变创面局部微环境等途径促进皮肤创面的愈合，具有较高的研究价值。其中，脂肪干细胞具有来源广泛、取材方便、对机体损伤小的优点，应用前景较好。但是，单一的脂肪干细胞对伤口愈合的治疗效果不够理想，限制了其有效的应用。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种复合干细胞生物制剂，其原料来源广泛、应用方便，而且能有效加快皮肤创面的愈合速度，促进皮肤的修复再生。

本发明提出的一种复合干细胞生物制剂，包括脂肪干细胞，胡萝卜苷，葛根素，β-谷甾醇，溶剂。

优选地，所述脂肪干细胞为1×10⁷-5×10⁷个/mL，胡萝卜苷为5-10μg/mL，葛根素为5-10μg/mL，β-谷甾醇为4-6μg/mL。

优选地，所述的复合干细胞生物制剂还包括细胞保护剂，所述细胞保护剂为海藻糖、人血白蛋白或两者的混合物；优选地，所述细胞保护剂为30-50μg/mL。

优选地，所述溶剂为PBS溶液或者生理盐水。

优选地，所述复合干细胞生物制剂的制备方法包括下述步骤：

S1、从脂肪组织中分离、培养脂肪干细胞；

S2、将得到的脂肪干细胞进行表型检测；

S3、将表型检测合格的脂肪干细胞用溶剂重悬，然后加入其余原料，配制得到复合干细胞生物制剂。

优选地，所述复合干细胞生物制剂的制备方法还包括将培养得到的脂肪干细胞进行低氧预处理。

优选地，所述低氧预处理的培养条件具体为：1％O₂，5％CO₂,94％N₂，37℃。

优选地，所述低氧预处理方法具体为：将传代培养得到的脂肪干细胞用胰酶溶液消化，然后接种到无血清培养基中，先在5％CO₂,37℃常氧培养2-3d，然后更换新鲜培养基，在1％O₂，5％CO₂,94％N₂，37℃条件下低氧培养1-2d。

优选地，所述步骤S1中，脂肪干细胞的分离、培养方法具体为：取脂肪组织，用0.2-0.3％的胶原酶溶液消化后，接种到无血清培养基中培养，2-3d后更换新鲜培养基，以后每1-2d更换一次，待细胞融合达到80-90％后传代。

优选地，所述步骤S3中，表型检测合格具体指：CD31、CD34和CD45＜1％，CD29、CD73、CD90＞95％。

本发明的有益效果如下：