[发明专利]一种FK506缓释纳米胶束的制备方法及其在制备干眼药物上的应用

说明书

一种FK506缓释纳米胶束的制备方法及其在制备干眼症药物上的应用，利用眼表具有带负黏蛋白层的性质，通过在纳米胶束表面嫁接多肽，由于多肽具有两性解离的性质，通过多肽设计，使其在泪液环境中呈现带正电的性质，从而增加纳米粒子与眼表组织的相互作用，增加药物的眼表停留及角膜穿透。

技术领域

本发明具体涉及干眼症技术领域，具体涉及一种FK506缓释纳米胶束的制备方法及其在制备干眼症药物上的应用。

背景技术

干眼是最常见的眼表疾病，其发病率高、病程反复、机制复杂、难以根治而成为重要的社会公共卫生问题。其中抗原递呈细胞激活T细胞导致的炎症级联反应，是干眼发病的关键因素之一。FK506作为临床常用免疫抑制剂，抑制T细胞的活化作用，因此具有抑制干眼的效果。但FK506作为一种疏水性药物，泪液中溶解度低、眼表滞留时间短、角膜透性差等缺点导致药物生物利用度低，临床用药效果不如预期。本研究以增加FK506角膜眼表滞留及渗透性以提高药物生物利用度为设计思路，构建具电荷响应的载FK506缓释带电纳米粒子。通过在体和离体兔角膜进行性能评价，干眼小鼠模型进行疗效评估。

作为一种眼表疾病，滴眼液处理是临床上常用的用药方式。FK506作为一种疏水性药物其在泪液中溶解度低、眼表滞留时间短、角膜渗透性差造成用药生物利用度低。

发明内容

为了解决现有技术存在的技术缺陷，本发明提供了一种FK506缓释纳米胶束的制备方法及其在制备干眼症药物上的应用。

本发明采用的技术解决方案是：一种FK506缓释纳米胶束的制备方法,其特征在于，通过以下步骤制备：

（1）嵌段共聚物的制备：称取γ-苄基-L-谷氨酸-N-羧酸内酸酐溶于10mL无水 N,N-二甲基甲酰胺（DMF）中，并置于圆底烧瓶内，室温下磁力搅拌，并通氮气，将两端分别为羧基和氨基的聚乙二醇（HOOC-PEG-NH2）溶于5 mL氯仿中，通氮气10 min 后，加入上述圆底烧瓶内，37 ℃下磁力搅拌反应24 h，乙醚沉淀，并过滤后，将沉淀用DMF复溶，用透析袋透析48h去除小分子反应副产物，并冷冻干燥得固体产物HOOC-PEG-PBG；

（2）负载FK50纳米胶束的制备，将HOOC-PEG-PBG与FK506按比例混合经透析袋透析相互作用，获得HOOC-PEG-PBG包载FK506形成核-壳结构的FK506缓释纳米胶束。

所述的γ-苄基-L-谷氨酸-N-羧酸内酸酐的用量为600 mg。

所述的聚乙二醇用量为500 mg。

所述的步骤（1）和步骤（2）中的透析袋的截留分子量（MWCO）均为3500 Da。

所述的步骤（2）中HOOC-PEG-PBG与FK506的质量比为800-920:80-200。

一种FK506缓释纳米胶束在制备干眼症药物上的应用。

所述的FK506缓释纳米胶束中HOOC-PEG-PBG与FK506的质量比为800-920:80-200。

本发明的有益效果是：本发明提供了一种FK506缓释纳米胶束的制备方法及其在制备干眼症药物上的应用，利用眼表具有带负黏蛋白层的性质，通过在纳米胶束表面嫁接多肽，由于多肽具有两性解离的性质，通过多肽设计，使其在泪液环境中呈现带正电的性质，从而增加纳米粒子与眼表组织的相互作用，增加药物的眼表停留及角膜穿透。

附图说明

图1为本发明胶束的载药量（a）和载药效率（b）评价。

图2为本发明载药胶束累积释放曲线测定。

图3为聚合物细胞安全性评价（a）和细胞摄取实验（b）。

图4为眼表炎症评价：a）裂隙灯观察；b）眼表评分。