[发明专利]一种无糖小分子肽粉的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种无糖小分子肽粉的制备方法及其应用，以贻贝肉为原料，依次经过步骤：提取水提粗蛋白、透析除盐、中性蛋白酶酶解、醇沉除糖和冻干，得无糖小分子贻贝肽。本发明以贻贝蛋白为原料，取材容易，可显著降低生产成本，满足大规模生产的需要；使用生物酶解的方法，得到具有成骨活性的混合贻贝肽，又用了除糖和超滤分离，得到无糖小分子贻贝肽，使产品更易于吸收；采取冷冻干燥技术对促成骨活性肽进行冻干，增加了产品的保存时间；制备的小分子贻贝肽是具有成骨活性的生物活性肽，可以成为制备功能食品的良好原料，尤其是对于无糖配料应用需求的各类食品，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及水产品加工技术领域，更具体地说，涉及一种无糖小分子肽粉的制备方法及其应用。

背景技术

目前，传统骨质疏松症治疗药物主要包括骨吸收抑制剂和骨形成促进剂。骨吸收抑制剂主要是通过抑制破骨细胞的形成和活性，从而抑制骨的吸收来减缓骨钙的丢失，但由于骨质疏松症患者通常都会钙吸收不足，若单独应用此类药物则可能造成低钙血症。而骨形成促进剂目前研究较少，主要包括甲状旁腺激素、细胞因子、氟化物和锶制剂等，但其来源有限，靶向性差也限制了其应用。随着现代患者在饮食与健康方面的意识提高，食源性生物活性肽因其具有安全、无毒副作用、价格竞争力强和易于吸收等优点在预防和治疗治骨质疏松领域受到了越来越广泛的关注。

贻贝(Mytilus edulis)是一种营养丰富的水产品。其每百克鲜贝肉含蛋白质10.8克，糖2.4克，灰分2.4克，脂肪1.4克，其蛋白质含量很高。贻贝蛋白的营养价值高且具有良好的抗氧化活性，抗炎活性及抗肿瘤活性。值得一提的是，贻贝的营养价值高还由于它所含的蛋白质有人体需要的缬氨酸、亮氨酸等8种必需氨基酸。越来越多的证据表明，蛋白质含量高的水产品通过消化酶解转化为小生物活性肽更加易于人体吸收，进而食用高蛋白质的水产品对人体有很大的益处。

目前对于骨质疏松的研究，医学上尚没有能够彻底治愈的方法，且因骨质疏松发病早期基本没有什么不良反应，因而，不易被发现，不能及时的进行治疗，但是一旦发病，将会很难治愈，外科手术以及目前常见的的预防和治疗骨质疏松的药物，长期服用这类药物会引起便秘等一系列不适反应症状，不仅医疗成本高，而且会有一定的毒副作用，并且很难达到彻底治愈的目的。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺点，提供一种无糖小分子贻贝肽的制备方法并开发了具有成骨活性的贻贝多肽产品。

为了达到上述目的，本发明提供一种无糖小分子肽粉的制备方法，包括步骤：

S1、贻贝水提粗蛋白的制备：取贻贝肉6000～12000rpm、匀浆3～10min，所得贻贝浆加水，1～25℃静置2～8h提取蛋白，然后离心取上清液A，得到的水提粗蛋白；其中，所述贻贝浆和水的重量体积比为：1:3～5g/mL；

S2、脱盐：将步骤S1所述水提粗蛋白离心，收集上清液B，将所述上清液B用500～3500D的透析袋和水进行透析脱盐，得到水提脱盐贻贝蛋白；将所述水提脱盐贻贝蛋白进行冷冻干燥，得到水提脱盐的贻贝蛋白冻干粉；

S3、酶解：将步骤S3所述水提脱盐的贻贝蛋白冻干粉，按料液重量比1:30～100加水复溶成溶液A，向所述溶液A中加入中性蛋白酶，在温度30～60℃下搅拌酶解2～6小时，所得酶解产物溶液为具有成骨活性的贻贝混合肽；其中，中性蛋白酶的添加量以所述溶液A中水提脱盐的贻贝蛋白冻干粉总重量为基准，每克水提脱盐的贻贝蛋白冻干粉加入中性蛋白酶3000～6000U；

S4、醇沉：取步骤S3所述具有成骨活性的贻贝混合肽，使用3KDa的超滤离心管进行超滤离心，取通过超滤离心管的穿透液，即分子量在3KDa以下的溶液，加入所述穿透液3～10倍体积的无水乙醇，静置18～24h，离心取上清液C；将所述上清液C置于60～75℃旋转蒸发至原体积的1/5～1/10，除去乙醇，得溶液B；干燥，得无糖小分子肽粉；所述干燥为冷冻干燥或喷雾干燥。