[发明专利]一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法在审
| 申请号： | 201910884933.4 | 申请日： | 2019-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN110590645A | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 卢文玉;刘臻;张传波 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C07D211/88 | 分类号： | C07D211/88 |
| 代理公司： | 12201 天津市北洋有限责任专利代理事务所 | 代理人： | 曹玉平 |
| 地址： | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酰亚胺 解淀粉芽孢杆菌 分离提纯 发酵液 粘稠物 洗脱 次级代谢产物 大孔树脂层析 淀粉芽孢杆菌 甲醇水溶液 大孔树脂 甲醇体系 浓缩分离 三氯甲烷 合并 硅胶柱 柱层析 旋蒸 萃取 发现 | ||
【权利要求书】：
1.一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法，其特征是包括如下步骤：
(1)将解淀粉芽孢杆菌发酵液离心取上清液；用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯萃取液；旋蒸除去乙酸乙酯，得黄色粘稠物；
(2)将所述黄色粘稠物经大孔树脂层析，依次用体积浓度为50％，60％，70％的甲醇水溶液进行洗脱，每个梯度使用4倍柱体积洗脱剂，得到Fr.1、Fr.2、Fr.3组分；
(3)将200-300目柱层析用硅胶粉用乙酸乙酯浸泡24-28h，装填在硅胶柱中；将组分Fr.2和Fr.3合并后使用硅胶柱柱层析，依次用体积比为(50：1)，(20：1)，(15：1)，(10：1)的三氯甲烷：甲醇体系洗脱，每个梯度使用3倍柱体积洗脱剂，每个梯度依次收集5份洗脱剂，共得到20个组分，依次为Fc.1～Fc.20；
(4)将Fc.17,Fc.18,Fc.19合并浓缩，通过高效制备液相进行分离，检测器为视差检测器，收集RT＝14min的组分为T1；
(5)将T1冷冻，再用冷冻干燥机冷冻干燥，得到环已酰亚胺固体。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens LWYZ003，保藏编号：CGMCC NO.18345。
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