[发明专利]石龙芮体细胞胚诱导方法与体细胞胚介导的遗传转化方法有效
申请号: | 201910884952.7 | 申请日: | 2019-09-19 |
公开(公告)号: | CN110786238B | 公开(公告)日: | 2022-04-08 |
发明(设计)人: | 徐克东;李成伟;张怡;张菊;李晓丽;常云霞;于德水 | 申请(专利权)人: | 周口师范学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;C12N15/82;C12N5/10 |
代理公司: | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人: | 刘静荣 |
地址: | 466001 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石龙芮 体细胞 诱导 方法 胚介导 遗传 转化 | ||
1.石龙芮体细胞胚诱导方法,其特征在于,所述诱导方法包括以下步骤:
(1)将石龙芮种子消毒,播于无菌苗培养基中,在4℃条件下催芽2-3 d,于黑暗、温度为25 ±1 ℃条件下,孵育种子,直至种壳露白,然后于25℃,16 h光照/8 h黑暗,光照度为120µmol.m-2s-1的条件下进行无菌苗培养,所述无菌苗培养基的配方为:MS盐、B5有机、30 g/L蔗糖、7.8 g/L琼脂粉,无菌苗培养基的pH 为5.8;
(2)选择无菌苗的根、茎或叶作为外植体,置于体细胞胚诱导培养基上,进行体细胞胚结构的诱导,其中,所述体细胞胚诱导培养基的配方为:MS盐、B5有机、10.0 mg/L NAA、30g/L蔗糖、3.6 g/L结冷胶,体细胞胚诱导培养基的pH为5.8;
(3)将诱导出的石龙芮体细胞胚转入生根培养基,进行培养,诱导胚体生根,其中,所述生根培养基的配方为:1/2 MS盐、1/2 B5有机、0.1 mg/L NAA、15 g/L蔗糖、3.6 g/L结冷胶,生根培养基的pH为5.8;
(4)炼苗、移栽。
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