[发明专利]一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒，属于生物检测技术领域。本发明的检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒包括反应液和反应装置两部分；本发明试剂盒可用于血清、血浆、末梢血或静脉血中PRV‑gE/gB抗体快速分析，具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优势；具有良好的稳定性、线性和准确性，可用于区分野毒感染的同时监测疫苗抗体水平，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒。

背景技术

伪狂犬病毒(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)感染引起的多种家畜和野生动物共患的一种急性传染病。猪是伪狂犬病最主要贮存宿主和传染源，该病在猪呈爆发性流行，可引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，新生仔猪腹泻、神经症状、大量死亡，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。英国、丹麦、荷兰、比利时及美国等欧美国家相继实现PRV净化。中国自2011年以来PRV gE阳性率逐年增高，防控力度越来越大。我国已启动PRV净化计划，要求2020年国家核心育种场必须PRV净化。

在PRV与宿主的相互作用中，结构蛋白gB非常保守，具有良好的免疫原性且抗原表位非常清晰可作为理想的血清学检测用抗原。gE蛋白是PRV的一种非常重要的糖蛋白，在决定PRV毒力及神经嗜性等方面起着重要作用，但是gE不是PRV增值所必需的蛋白，常作为缺失的候选基因。检测PRV抗体时要同时监测gE、gB两种抗体，PRV gE抗体检测能有效的区分野毒感染，结合gB抗体检测，能在区分野毒感染的同时监测疫苗抗体水平。因为野毒感染时gB、gE同时阳性，如果没有感染野毒，免疫gE基因缺失疫苗后，gE阴性，gB阳性。若只检测gB抗体，检测结果gB抗体水平很高有可能是野毒感染所致；若只检测gE呈阳性说明野毒感染，为了保护易感猪群还需检测gB抗体水平确定免疫方案。

PRV鉴别诊断方法包括PCR、ELISA、IPMA、免疫层析等，PCR和IPMA由于操作复杂，需要专业知识和特殊设备，所以难以广泛推广和现地检测。目前，单克隆抗体已成为研究各种疾病的良好工具。单克隆抗体由于具有特异性强、均质性高、易于标准化以及可批量生产等优点，已被广泛应用于免疫学、肿瘤学、遗传学和其他学科中各种复杂现象的研究中，也广泛应用于诊断、治疗、生物材料的纯化等技术实践中，并以诊断应用居多。胶体金免疫层析技术具有快速简便优点，但也存在灵敏度低、准确性重复性较差、难以进行定量等缺点。近几年，随着POCT技术的发展，荧光免疫层析技术有了长足的发展，该技术克服了GICA的不足并保留了快速、简便的优势，其高灵敏、高特异的优势使其在现地有了很好的应用。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种检测猪伪狂犬病毒抗体的试剂盒，该试剂盒可用于末梢血或静脉血中PRV抗体的快速分析，具有灵敏度高、特异性强、重复性好的优点。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：