[发明专利]乌鳢蛋白来源的ACE抑制肽及其制备方法有效
申请号: | 201910885922.8 | 申请日: | 2019-09-19 |
公开(公告)号: | CN110698540B | 公开(公告)日: | 2021-06-25 |
发明(设计)人: | 王远鹏;唐碧灵 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K7/08;C12P21/06 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭;游学明 |
地址: | 361000 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白 来源 ace 抑制 及其 制备 方法 | ||
1.乌鳢蛋白来源的ACE抑制肽的制备方法,包括如下步骤:
(1)原料准备:将新鲜的乌鳢仅保留背部肌肉,去刺去皮,冷却水漂洗1-2次,绞碎,冷冻干燥,磨粉,过40目筛,收集过筛的鱼粉冷藏备用;
(2)乌鳢蛋白酶解液制备:按重量体积比,称取0.1-2%的鱼粉溶于超纯水中,搅拌过夜,离心取上清即得乌鳢蛋白;将乌鳢蛋白调节至pH=2-4,加入1-7%的胃蛋白酶,36-38℃下水解4-8 h,水解过程中不断搅拌,水解完成后85-95℃水浴8-10 min灭酶;
(3)首先利用超滤管或超滤膜对酶解液进行粗分,得到1-3 KDa组分,再将该组分利用反相高效液相色谱进一步分离纯化,按照出峰时间收集多肽,得到ACE抑制肽,所述的ACE抑制肽为FRVPTPNVS或HVNKDIAPKL或KIKIIAPPERKYS中的至少一种。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,采用反相液相色谱分离,流速为4 mL/min,流动相A为乙腈,含0.1%三氟乙酸;流动相B为水,含0.1%三氟乙酸;0-5 min,5% A;5-30 min,5%-75% A;按照出峰时间收集多肽组分,12-15 min收集的多肽组分为最佳的ACE抑制肽组分。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中直接用超纯水溶解乌鳢鱼粉,鱼粉质量与水的体积比为1:100。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中将胃蛋白酶用于酶解乌鳢蛋白,加酶量为4%。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,利用截留分子量为10 KDa、3KDa、1 KDa的超滤管对酶解液进行粗分,得到1-3 KDa组分。
6.ACE抑制肽,其特征在于:所述的ACE抑制肽序列为:FRVPTPNVS或HVNKDIAPKL或KIKIIAPPERKYS。
7.如权利要求6所述的ACE抑制肽在制备调节血压的保健食品或药物中的用途。
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