[发明专利]基于LAMP技术的转基因抗除草剂外源基因的检测方法及试剂盒

权利要求书

1.基于LAMP技术的转基因抗除草剂外源bar基因的特异性LAMP引物，其特征是：根据转基因抗除草剂外源bar基因特异性设计。

2.根据权利要求1所述的转基因抗除草剂外源bar基因的特异性LAMP引物，其特征是：包括外引物、内引物、环引物，优选为：

外引物barB3：AGGTGGACGGCGAGGT

外引物barF3：TGCATGCGCACGCTC

内引物barBIP：TGGCGGGGGGAGACGTACAGGGTCCCTGGAAGGCA

内引物barFIP：TGCTGAAGTCCCTGGAGGCACAGTTGGGCAGCCCGATG

环引物barLB：CGGTTGACTCGGCCGTCCAGTCGTAGGCGTTGCG

环引物barLF：GGGCTTCAAGAGCGTGGTCGCTGT。

3.基于LAMP技术检测转基因抗除草剂外源bar基因的基础检测试剂盒，其特征是：包括权利要求2所述LAMP外引物、内引物。

4.基于LAMP技术检测转基因抗除草剂外源bar基因的加速检测试剂盒，其特征是：包括权利要求2所述LAMP外引物、内引物、环引物。

5.基于LAMP技术的转基因抗除草剂外源pat基因的特异性LAMP引物，其特征是：根据转基因抗除草剂外源pat基因特异性设计。

6.根据权利要求5所述的转基因抗除草剂外源pat基因的特异性LAMP引物，其特征是：包括外引物、内引物、环引物，优选为：

外引物patB3：GGTAACTGGCCTAACTGGC

外引物patF3：GGCGCAAGGTTTTAAGTCTG

内引物patBIP：ATTGCGCGCAGCTGGATACAA-GGAGGAGCTGGCAACTCA

内引物patFIP：TACCCCGGGCTGTGTATCCC-ATAGGCCTTCCAAACGATCC

环引物patLB：GCATGGTGGATGGCATGATGTTGGTTTTTGGCAAAGGGA

环引物patLF：AAGCCTCATGCAACCTAACAGAT。

7.基于LAMP技术检测转基因抗除草剂外源pat基因的基础检测试剂盒，其特征是：包括权利要求6所述LAMP外引物、内引物。

8.基于LAMP技术检测转基因抗除草剂外源pat基因的加速检测试剂盒，其特征是：包括权利要求6所述LAMP外引物、内引物、环引物。

9.根据权利要求3或4或7或8所述的检测试剂盒，其特征是：还包括DNA聚合酶、dNTPs、10x LAMP反应缓冲液、去离子水。

10.根据权利要求3或4或7或8所述的检测试剂盒，其特征是：还可以包括信号报告分子用于指示检测结果，以荧光信号指示结果时，信号报告分子可以是荧光分子如SYBR GreenI；以肉眼可见的比色信号指示结果时，信号报告分子可以是羟基萘酚蓝或中性红。

11.根据权利要求9所述的10x LAMP反应缓冲液，其特征是：优选为200mM Tris-HCl(pH8.8)，600mM KCl，80mM MgSO₄，100mM(NH₄)₂SO₄，1％Triton X-100。

12.根据权利要求9所述的10x LAMP反应缓冲液，其特征是：以中性红为信号报告分子时，优选为50mM Tris-HCl(pH8.8)，600mM KCl，80mM MgSO₄，100mM(NH₄)₂SO₄，1％ TritonX-100。