[发明专利]一种鸡冠花HPLC特征指纹图谱的构建方法及黄酮类成分含量测定

说明书

本发明涉及一种鸡冠花HPLC特征指纹图谱的构建方法及黄酮类成分含量测定。所述的鸡冠花药材HPLC特征指纹图谱的建立方法包含如下步骤：（1）精密称取鸡冠花药材，制备得到鸡冠花供试品溶液；（2）将鸡冠花供试品溶液采用高效液相色谱仪分析，得到鸡冠花HPLC特征指纹图谱；黄酮类成分含量测定方法为：（1）吸取不同浓度的混合对照品溶液注入高效液相色谱仪，以进样浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线，确定线性回归方程；（2）将待测鸡冠花样品溶液注入高效液相色谱仪，测定相应峰面积；（3）通过线性回归方程计算，即得；该方法精密度、稳定性和重现性较好，能更好的评价鸡冠花药材的质量。

技术领域

本发明涉及中药材检测技术领域，具体公开了一种鸡冠花HPLC特征指纹图谱的构建方法及黄酮类成分含量测定。

背景技术

鸡冠花为苋科(Amaranthaceae)青葙属植物鸡冠花(Celosia cristata L.)的干燥花序，具有收敛止血，止带，止痢之功效。味甘涩，归肝经，入血分。《本草纲目》载：“鸡冠花可治疗痔漏下血，赤白下痢，崩中，赤白带下，分赤白用”。鸡冠花起源于非洲、美洲和亚洲热带地区，唐代引入我国，明代已栽种普遍，现全国均有种植。

目前对鸡冠花的质量研究鲜有报道，大部分文献均只对鸡冠花进行了单一的指纹图谱研究，没有对其多种成分进行研究，存在很大的局限性，到目前为止，尚未有只用一个色谱系统就可同时测定能体现 鸡冠花药材特征信息的指纹图谱及同时测定其黄酮类成分的方法，这一问题亟待解决。中药成分复杂，仅以几个化合物的含量作为质量的评价指标亦是不全面的。中药指纹图谱是指中药材或中药制剂经适当处理后采用一定的分析手段，得到能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术存在的缺陷与不足，提供了一种鸡冠花HPLC特征指纹图谱的构建方法及其黄酮类成分含量的测定方法，该方法精密度高、稳定性好、重复性好，通过所构建的指纹图谱及其黄酮类成分的测定能够对鸡冠花药材进行全面而有效的检测。

本发明所要解决的上述技术问题，通过如下技术方案予以实现：

一种鸡冠花药材的HPLC特征指纹图谱的构建方法，其包含如下步骤：

（1）精密称取鸡冠花药材，制备得到鸡冠花供试品溶液；

（2）将鸡冠花供试品溶液采用高效液相色谱仪分析，得到鸡冠花药材的HPLC特征指纹图谱。

作为一种优选方案，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温为28~32℃；以乙腈为流动相A，以0.18~0.22%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.9~1.1ml/min；检测波长为254~365nm；进样量为8~15μl，所述磷酸水溶液含体积分数为0.15~0.25%三乙胺。

作为一种最优选方案，所用高效液相色谱仪分析的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温为30℃；以乙腈为流动相A，以0.20%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱；流速为1.0ml/min；检测波长为290nm；进样量为10μl，所述的磷酸水溶液含体积分数为0.20%三乙胺。

作为一种优选方案，所述梯度洗脱条件为 ：0~5min，乙腈的体积分数变化为13~18%，磷酸的体积分数变化为87~82%；5~6min，乙腈的体积分数变化为18~20%，磷酸的体积分数变化为82~80%；6~18min，乙腈的体积分数变化为20%，磷酸的体积分数变化为80%；18~23min，乙腈的体积分数变化为20~38%，磷酸的体积分数变化为80~62%；23~32min，乙腈的体积分数变化为38%，磷酸的体积分数变化为62%；32~38min，乙腈的体积分数变化为38~55%，磷酸的体积分数变化为62~45%；38~43min，乙腈的体积分数变化为55%，磷酸的体积分数变化为45%。