[发明专利]一种利用角蛋白酶提取DNA的方法

权利要求书

1.一种利用角蛋白酶提取DNA的方法，其特征在于：包括以下步骤：

A、取样，对样品进行处理，往样品中加入角蛋白酶和裂解液，混匀后加热消化裂解；

B、将高速离心后的上清液转移至新的离心管中，往离心管中加入结合液，通过DNA结合载体结合DNA；

C、用乙醇溶液漂洗DNA结合载体；

D、用脱洗液洗脱DNA。

2.根据权利要求1所述的一种利用角蛋白酶提取DNA的方法，其特征在于：步骤A中所述的样品为头发、指甲、指纹中的一种，具体由如下方法处理：

1)头发：取头发一根，去除毛囊部位，剪取靠近毛囊端3-4厘米长部位放入离心管中；

2)指甲：取指甲一块，剪成小块放入离心管中；

3)指纹：用沾有纯化水的拭子擦拭指纹，折断拭子头放入离心管中。

3.根据权利要求1所述的一种利用角蛋白酶提取DNA的方法，其特征在于：步骤A中所述的角蛋白酶的浓度为5Units/ul，角蛋白酶的用量为10ul；步骤A中所述的裂解液成分为：10mmol/l Tris-HCl，m/v浓度为0.1％的十二烷基硫酸钠，1mmol/lEDTA，裂解液pH值为10.0，裂解液的用量为300ul。

4.根据权利要求1所述的一种利用角蛋白酶提取DNA的方法，其特征在于：步骤B中所述的结合液成分为：4.5mol/l异硫氰酸胍，100mmol/l柠檬酸钠，结合液的pH值5.5，结合液的用量为450ul。

5.根据权利要求1所述的一种利用角蛋白酶提取DNA的方法，其特征在于：步骤B中所述的DNA结合载体为磁珠、硅珠、硅胶模中的一种。

6.根据权利要求5所述的一种利用角蛋白酶提取DNA的方法，其特征在于：通过磁珠提取DNA的具体步骤如下：

1.1:进行取样，对样品进行处理，将处理后的样品加入离心管中，往离心管加入角蛋白酶和裂解液,进行搅拌5-15min，在温度为50℃的条件下，进行水浴加热3-6h，制得第一混合溶液；

1.2：将步骤1.1装有第一混合溶液的离心管，放入离心机中，在转速为12000rpm的条件下，进行离心1min，将上清液转移至新的离心管内，加入结合液和磁珠，将离心管放置在振荡器上，在转速为1300rpm的室温条件下，震荡5-15min，将离心管放置在磁力架上静置5-10min，去除上清液得到第一中间体的磁珠；

1.3：漂洗液加入步骤1.2装有磁珠的离心管中，将离心管放置在振荡器上，在转速为1300rpm的室温条件下，震荡5-10min，将离心管放置在磁力架上静置5-10min，去除上清液，再次加入漂洗液在转速为1300rpm的室温条件下，震荡5-10min，将离心管放置在磁力架上静置5-10min，去除上清液，得到含有第二中间体的磁珠；

1.4：将步骤1.3制得的含有第二中间体的磁珠放入新的离心管中，加入洗脱液，在温度为65℃，转速为1300rpm的条件下，震荡10-15min，取出磁珠，制得DNA溶液。