[发明专利]蚓酶多肽抑菌营养液的生产方法及其应用

说明书

本发明提供了一种蚓酶多肽抑菌营养液的生产方法，属于有机农业技术领域，具体涉及一种蚓酶多肽抑菌营养液的生产方法及其应用。包括步骤一：对蚯蚓、动物脏器进行预处理；步骤二：对步骤一中预处理后的蚯蚓进行分级提取，提取得到三种蚯蚓蛋白酶酶原；步骤三：将步骤二制得的三种酶原分别进行激活，制备得到三种酶。步骤四：将步骤一中预处理后的蚯蚓和动物脏器混合，匀浆，加入纯水，分别加入步骤三中制得的三种蛋白酶，酶解后，过滤，得三种酶促水解液，将三种酶促水解液混合，搅拌均匀后，过滤，得蚓酶多肽抑菌营养液成品。用于植物时，可使得植物长势更好，降低常见病发病率，同时改良土壤，有效提高植物抗病虫和抗逆能力。

技术领域

本发明属于多种生物酶联合制备、生物活性成分的分离提取技术和有机农业技术领域，具体涉及一种蚓酶多肽抑菌营养液的生产方法及其应用。

背景技术

近年来，过量施用化肥农药造成土壤有机质和腐殖质的缺乏，土壤结构遭到破坏，不仅导致土壤肥效降低、土壤酸碱化板结和次生盐渍化，还直接造成了农业生产成本的提高，直接影响农产品的口感和品质。过量使用农用化学品对土壤微生物菌群生态造成破坏的同时导致了生态环境的大范围面源污染。而随着人民生活水平和健康意识的提高，对有机农产品的需求量迅猛提升的同时对生态文明建设提出了更高需求。

蚯蚓是土壤生物群的主要组成成员之一，对土壤形成、维持土壤结构和发挥肥力产生重要影响，被称为“土壤生态系统工程师”。蚯蚓蛋白质含量高达70％，富含镁、锌、锰、铁、钼、硼等多种元素和千余种生物酶，1837年被达尔文称之为地球上最有价值的生物。

中国专利文献CN108299021A一种蚯蚓活性酶多肽液的生产方法公开的技术，将蚯蚓在蚯蚓酶解液作用下快速酶解，从而获得蚯蚓活性酶植物多肽液。其中蚯蚓酶解液按照以下步骤进行：将鲜蚯蚓去除杂质、洗净，沥干；将沥干蚯蚓捣碎，将捣碎的蚯蚓与水按质量比1:0.2～0.25比例混合，倒入恒温箱中，设定温度为40～45℃，pH值为6～9条件下，水解24h，每隔2h搅拌一次；将液体于离心机中，以10000～13000r/min离心，取上清液即为蚯蚓酶解液。但该专利提供的方法未对蚯蚓中的各种酶进行分类，已知蚯蚓中有至少1000种酶存在，不是所有酶都会对植物生长起到促进作用，甚至有些酶会对植物生长起到抑制作用。

可见，现有技术中对于蚯蚓的应用还比较简单，且方法也比较粗糙，甚至有些传统方法会直接撒入白糖使蚯蚓溶解，这样做无法充分提取蚯蚓中所含的有效成分，也无法使有效成分更好地发挥作用。因此，如何研发更加先进的提取方法和营养液配制方式，配制能够更加充分利用蚯蚓体内有效成分的营养液，使其在植物生长等各个方面发挥作用，并且探索其更多的应用领域的生产方法，就成为本领域中迫切需要解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，如何充分利用蚯蚓中有效成分，使其发挥出更好的作用，用于植物时，使植物长势更好，降低常见病害发病率，同时改良土壤，有效提高植物抗病虫和抗逆能力。本发明提供的技术方案如下：

一种蚓酶多肽抑菌营养液的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：对蚯蚓、动物脏器进行预处理；

步骤二：对步骤一中预处理后的蚯蚓进行分级提取，提取得到三种蚯蚓蛋白酶酶原，分别为碱性蛋白酶酶原A、中性蛋白酶酶原B和酸性蛋白酶酶原C；

步骤三：将步骤二制得的三种酶原分别进行激活，制备得到蚯蚓碱性蛋白酶、蚯蚓中性蛋白酶和蚯蚓酸性蛋白酶；

步骤四：将步骤一中预处理后的蚯蚓和动物脏器混合后，匀浆并加入纯水，加入步骤三中制得的蚯蚓碱性蛋白酶，酶解后过滤，滤液作为得酶促水解液①备用；

将步骤一中预处理后的蚯蚓和动物脏器混合后，匀浆并加入纯水，加入步骤三中制得的蚯蚓中性蛋白酶，酶解后过滤，滤液作为酶促水解液②备用；