[发明专利]一株木霉菌株HB20111在消解作物连作障碍因子酚酸类自毒物质方面的应用及菌剂

说明书

本发明属于菌株及其应用技术领域，涉及一株具有酚酸消解功能的菌株及应用，具体为一株木霉菌株HB20111在消解作物连作障碍因子酚酸类自毒物质方面的应用及菌剂。该木霉菌株HB20111，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏编号是：CGMCC No.16963，保藏日期为2018年12月5日。该木霉菌株HB20111具有消解酚酸类物质的能力，7d后HB20111对丁香酸、阿魏酸、苯甲酸的消除率达到100％。

技术领域

本发明属于菌株及其应用技术领域，涉及一株具有酚酸消解功能的菌株及应用，具体为一株木霉菌株HB20111在消解作物连作障碍因子酚酸类自毒物质方面的应用及菌剂。

背景技术

木霉菌(Trichoderma spp.)已作为一种防治土传病害、生物安全、无污染、无残留的高效生防菌株被业界认可，本研究室曾研究发现木霉菌LTR-2具有消除草酸的作用，进而降低灰霉病原菌的致病力；研究还发现，不同木霉菌对草酸的降解能力不同，防治病害作用也不同。而西洋参连作障碍主要因素之一是自毒物质酚酸的积累，因此，本研究通过筛选能够消解酚酸类物质的木霉菌株，研究其降解谱，选育广谱降解木霉菌株，并通过田间小区试验进而筛选具有降解土壤自毒物质、促进西洋参生长的木霉菌株，研发木霉菌菌剂及应用技术，构建木霉菌解除西洋参连作障碍的技术体系，为西洋参产业健康、可持续发展和乡村振兴计划提供技术支撑。

发明内容

本发明提供一株木霉菌株HB20111在消解作物连作障碍因子酚酸类自毒物质方面的应用及菌剂，该木霉菌株HB20111是从滨州黄河边采集的土样中分离获得的，具有消解酚酸类物质的特性。

本发明的技术方案为：

一株木霉菌株HB20111在消解作物连作障碍因子酚酸类自毒物质方面的应用及菌，该木霉菌株HB20111，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏编号是：CGMCC No.16963，保藏日期为2018年12月5日，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，分类命名：深绿木霉Trichoderma atroviride。经形态学与ITS序列分析，将HB20111鉴定为深绿木霉(T.atroviride)。

本发明的木霉菌株HB20111通过土壤处理、拌种、蘸根、灌根或浸泡种子的方式进行消解酚酸类物质。

所述的消解酚酸类物质包括丁香酸、阿魏酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸、香草酸、对香豆酸、水杨酸等。

进一步的，采用木霉菌株HB20111发酵培养获得的分生孢子进行消解酚酸类物质；具体为采用由分生孢子母药制备得到的菌剂，通过土壤处理、拌种、蘸根、灌根或浸泡种子。

所述的分生孢子母药的制备方法为，(1)斜面培养：采用PDA培养基，将菌株HB20111接种在试管培养基上，28℃培养2-3d；

(2)三角瓶培养：采用PDB培养基，将试管菌种接种在液体三角瓶中，置于摇床上28℃振荡培养1d；

(3)液体培养：采用液体发酵培养基，115℃灭菌30min，将菌种接种到发酵罐，接种量0.1％(v/v)，28℃培养，通气量1：0.5-1.0，搅拌速度为160r/min，培养1-2d；

(4)固体培养：采用固体发酵培养基，121℃灭菌30min，在拌料罐中将液体菌种与固体培养基混合均匀，接种量为2-5％(v/v)，接种完毕转移到固体培养室，培养基厚度为3-4cm，料温控制在28±2℃，室温控制在22-25℃，培养室空气的相对含水量为95-100％，培养时间为3-4d；

(5)孢子收集：培养后用生理盐水洗脱分生孢子，5 000r/min以上离心10min，收集沉淀，得到分生孢子；

(6)分生孢子母药制备：将上述分生孢子与硅藻土按照1:10进行充分混匀，过80筛后备用。