[发明专利]一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201910898709.0 | 申请日： | 2019-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN110484605B | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 周琳;陈鸣;唱凯 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6841 | 分类号： | C12Q1/6841;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 瞿晓晶 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 原位 检测 microrna 34 基因 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于活细胞原位检测microRNA-34的基因，其特征在于，所述基因由P1、P2、P3、P4、P5和P6组装成立体镊子结构，所述立体镊子结构包括5条边和4个面；所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P5的核苷酸序列如SEQID NO.5所示，所述P6的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
在所述立体镊子结构中，所述P1和P2的结合部分形成固定边1；P1和P3的结合部分连接P1和P5的结合部分形成边2：P2和P3的结合部分连接P2和P5的结合部分形成边3；P2和P4的结合部分连接P2和P6的结合部分形成边4；P1和P4的结合部分连接P1和P6的结合部分形成边5；所述固定边1、边2和边5形成面1，所述固定边1、边3和边4形成面2，所述面1和面2以所述固定边1为轴开合；在所述边2和边3之间包括microRNA的结合部；
在所述P5和P6的两端均分别包含有所述荧光基团和荧光淬灭基团。
2.权利要求1所述基因的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将P1、P2、P3、P4、P5和P6等体积混合后，于95℃下变性5min，降温后得所述基因。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述P1、P2、P3、P4、P5和P6的浓度均为10μM。
4.一种活细胞原位检测microRNA-34的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述基因或利用权利要求2或3所述制备方法制备得到的基因。
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