[发明专利]靶向前列腺癌的增强型CAR-T细胞及其制备方法和药物

权利要求书

1.一种增强型CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞的细胞膜上表达有第一受体和第二受体；

所述第一受体为嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体具有结合前列腺癌抗原的抗原结合结构域；

所述第二受体包括位于胞外的特异性结合TGFβ的TGFβ结合结构域和位于胞内的持续激活IL-7信号通路的IL-7激活信号传导结构域。

2.根据权利要求1所述的增强型CAR-T细胞，其特征在于，所述TGFβ结合结构域选自TGFβII型受体的胞外段；

优选地，所述TGFβII型受体的胞外段的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示。

3.根据权利要求2所述的增强型CAR-T细胞，其特征在于，所述IL-7激活信号传导结构域具有不依赖于配体结合的自主持续传导IL-7信号的功能；

优选地，所述IL-7激活信号传导结构域由IL-7受体突变体的跨膜区和胞内区组成；

优选地，所述IL-7受体突变体的跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示；

优选地，所述IL-7受体突变体的胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。

4.根据权利要求1-3任一项所述的增强型CAR-T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体还具有跨膜结构域和共刺激信号传导区；

所述跨膜结构域选自：CD8、CD28、CD33、CD37、CD8α、CD5、CD16、ICOS、CD9、CD22、CD134、CD137、CD154、CD19、CD45、CD4、和CD3ε中的一种或多种的跨膜结构域；

优选地，所述跨膜结构域选自CD8的跨膜结构域；

优选地，所述跨膜结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示；

优选地，所述共刺激信号传导区包含共刺激分子的细胞内结构域，所述共刺激分子选自：CD27、CD3ζ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD5、CD22、CD79a、CD79b、CD66d、CD2、CD4、CD5、CD28、CD30、CD40、CD134、CD137、ICOS、CD154、4-1BB、OX40、CD7、LIGHT、NKG2C和B7-H3中的一种或多种；

优选地，所述共刺激信号传导区包括4-1BB的细胞内结构域和CD3ζ的细胞内结构域；

优选地，4-1BB的细胞内结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示；

优选地，CD3ζ的细胞内结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示。

5.根据权利要求4所述的增强型CAR-T细胞，其特征在于，所述抗原结合结构域所结合的前列腺癌抗原为PSMA；

优选地，所述抗原结合结构域选自scFv、Fab、Fab’和F(ab’)2中的任意一种；

优选地，所述抗原结合结构域选自scFv，所述抗原结合结构域的氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示。

6.如权利要求1-5任一项所述的增强型CAR-T细胞的制备方法，其特征在于，其包括：将表达所述第一受体和所述第二受体的病毒感染未经修饰的T细胞。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述病毒为慢病毒。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述未经修饰的T细胞分离自需要治疗前列腺癌的主体的血液。

9.根据权利要求6-8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述前列腺癌为去势抵抗性前列腺癌。

10.一种治疗前列腺癌的药物，其特征在于，其含有作为活性成分的如权利要求1-5任一所述的增强型CAR-T细胞。