[发明专利]靶向前列腺癌的增强型CAR-T细胞及其制备方法和药物

说明书

本发明公开了靶向前列腺癌的增强型CAR‑T细胞及其制备方法和药物，涉及免疫治疗技术领域。该CAR‑T细胞的细胞膜上表达有第一受体和第二受体，第一受体为嵌合抗原受体，嵌合抗原受体具有结合前列腺癌抗原的抗原结合结构域；第二受体包括位于胞外的特异性结合TGFβ的TGFβ结合结构域和位于胞内的持续激活IL‑7信号通路的IL‑7激活信号传导结构域。本发明提供的CAR‑T细胞可以靶向前列腺癌，中和肿瘤微环境中TGFβ对T细胞的抑制作用，同时激活IL‑7‑STAT 5信号通路促进T细胞的增殖和存活，该CAR‑T细胞具有增强的抗肿瘤活性，可用于前列腺癌的治疗。

技术领域

本发明涉及免疫治疗技术领域，具体而言，涉及一种靶向前列腺癌的增强型CAR-T细胞及其制备方法和药物。

背景技术

嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞(CAR-T)的过继细胞疗法是目前最有前景的免疫治疗方法，尤其是针对难治性白血病和淋巴瘤，取得了巨大的成效。但是在实体癌例如前列腺癌方面，治疗效果却不尽人意。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种靶向前列腺癌的增强型CAR-T细胞及其制备方法和药物。本发明提供的CAR-T细胞可以靶向前列腺癌，并具有抑制TGFβ信号通路同时激活IL-7信号通路的特点，该CAR-T细胞具有增强的抗肿瘤活性。

本发明是这样实现的：

前列腺癌是男性中发病率和死亡率都很高的疾病。并且易复发和转移。利用免疫疗法虽有一定的效果，但疗效不好的原因之一是：在恶性肿瘤微环境中，有多种机制能够抑制免疫细胞反应，如抑制细胞和细胞结合的可溶性因子，抑制这些因子如PD-1和CTLA-4在一定程度可以清除部分肿瘤细胞，但后期若发展为去势抵抗性前列腺癌则对这些抑制剂的效果不响应。但在很多肿瘤特别是前列腺癌中，发现转化生长因子(TGFβ)大量表达。TGFβ在肿瘤组织中大量积聚，诱导许多细胞外变化介质的表达。TGFβ在调节免疫反应的起始，发展，维持和消退方面具有重要作用，是一种有效的免疫抑制剂。大多数恶性肿瘤细胞可以通过TGFβ的过量产生逃避宿主免疫监视和促进自身发展。

TGFβ大量表达会抑制IL-2的表达，因此抑制IL-2引起的T细胞的扩增。IL-7可以替代IL-2调节TGFβ抗性。IL-7信号传导是T细胞在其整个生命过程中赖以生存的必须因素，且所有淋巴细胞的早期发育阶段都需要通过IL-7的介入来完成。在T细胞中，IL-7是促使T细胞成熟和分化的非冗余细胞因子，并且它对于外周淋巴组织中成熟T细胞存活仍然是必需的。

前列腺特异性膜抗原(prostrate specific membrane antigen，PSMA)其在前列腺癌中高表达，在正常组织中不表达或者低表达，已有多种证据表明是免疫治疗前列腺癌的理想靶点，利用靶向PSMA的CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗中显示出极大的特异性，靶向性和较少的主要组织相容性复合物限制，在临床前研究及临床实验中证明了CAR-T细胞的有效性和安全性，但其应用仍有局限，所以还需要进一步的研究和探索。

基于此，第一方面，本发明实施例提供一种增强型CAR-T细胞，所述CAR-T细胞的细胞膜上表达有第一受体和第二受体；

所述第一受体为嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体具有结合前列腺癌抗原的抗原结合结构域；

所述第二受体包括位于胞外的特异性结合TGFβ的TGFβ结合结构域和位于胞内的持续激活IL-7信号通路的IL-7激活信号传导结构域IL-7。

本发明提供的增强型CAR-T细胞通过结合前列腺癌抗原的抗原结合结构域靶向前列腺癌，利用TGFβ结合结构域结合TGFβ，减少TGFβ对肿瘤细胞的促进和其对T细胞的免疫抑制作用；利用IL-7激活信号传导结构域持续传导IL-7信号以代替IL-2，促进CAR-T细胞的增殖存活，进而增强其对前列腺癌的杀伤能力。