[发明专利]一种美洲大蠊及其相关产品中组织修复因子PA1的含量测定方法

权利要求书

1.一种美洲大蠊及其相关产品中组织修复因子PA1的含量测定方法，其特征在于，以组织修复因子PA1作为对照品，PA1的结构如式I所示：

pGlu-Val-Leu-Val-Ser-Pro-Ala-Phe-Tyr-Gly-Val-Val-Pro-Ala-Val-Val-Pro-Ala-Val-Gln-Pro-Gly-Tyr-Val-Ala-Ala-Thr-Arg-Gly-Ser-Leu-His-Val-Ala-Pro-Leu-Pro-Gly-Asn-Val-Pro-Tyr-Ala-Ser-His-His-Leu-Asn-Leu-Ala-Pro-Ala-Pro-Gly-Thr-Leu

(式I)；

所述组织修复因子PA1的含量测定方法为高效液相色谱法；

其中前处理手段包括：大孔树脂柱、反相固相萃取柱或反相C-18柱预处理；

色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：A相为甲醇或乙腈，B相为0.04mol/L磷酸二氢钠水溶液或0.05～1％冰醋酸或0.05～1％甲酸或0.005～0.5mol/L醋酸铵水溶液；

检测器为蒸发光散射检测器或紫外检测器，其中紫外检测器的检测波长为195～220nm；

流动相梯度洗脱程序为：0min时，10％A，90％B；5min时，30％A，70％B；13min时，30％A，70％B；22min时，32％A，68％B；40min时，32％A，68％B；

或0min时，10％A，90％B；5min时，30％A，70％B；20min时，35％A，65％B；40min时，40％A，60％B。

2.根据权利要求1所述的一种美洲大蠊及其相关产品中组织修复因子PA1的含量测定方法，所述美洲大蠊及其相关产品选自美洲大蠊药材、美洲大蠊提取物或康复新液。

3.根据权利要求1或2任一项所述的一种美洲大蠊及其相关产品中组织修复因子PA1的含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备组织修复因子PA1对照品溶液

取组织修复因子PA1对照品适量，精密称定，加含水甲醇配制对照品溶液；

(2)制备供试品溶液

①提取

a.美洲大蠊药材

精密称定美洲大蠊药材粉末，用含水甲醇热回流提取，补重、摇匀、滤过；

b.美洲大蠊提取物

用含水乙醇提取粉碎或未粉碎的美洲大蠊药材，提取物浓缩，加入10倍体积热水，保温静置分层，弃去上层油液，水溶液浓缩干燥得美洲大蠊提取物；

c.康复新液

取康复新液50mL；

②前处理

上述样品用大孔树脂柱或反相固相萃取柱或反相C-18柱进行预处理，收集目标部位，回收溶剂至干，残渣复溶后用0.22μm有机滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

(3)测定法

分别取上述对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，以标准曲线法计算含量，即得。