[发明专利]NAT基因作为筛选标记在衣藻遗传转化中的应用

权利要求书

1.诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因作为筛选标记在衣藻遗传转化中的应用。

2.诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因作为筛选标记在制备衣藻目的基因表达株和/或转基因衣藻藻株中的应用。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：

所述诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因为如下1）-4）中任一种的DNA 分子：

1）序列表中的序列1 所示的DNA 分子；

2）编码区为序列表中的序列1所示的DNA 分子；

3）序列表中的序列2 所示的DNA 分子；

4）编码区为序列表中的序列2所示的DNA 分子。

4.与权利要求3中所述的诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因相关的生物材料在制备衣藻目的基因表达株或转基因衣藻藻株中的应用，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：

C1）含有权利要求3中诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因的表达盒；

C2）含有权利要求3中诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因的重组载体、或含有C1）所述表达盒的重组载体；

C3）含有权利要求3中诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因的重组微生物、或含有C1）所述表达盒的重组微生物、或含有C2）所述重组载体的重组微生物；

C4）含有权利要求1或2中诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因的转基因衣藻细胞系、或含有C1）所述表达盒的转基因衣藻细胞系、或含有C2）所述重组载体的转基因衣藻细胞系。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：C1）所述表达盒为HR-NAT-HA或HR-NAT，所述HR-NAT-HA的序列如序列表中序列4所示，其中，序列4的第1位~第509位为启动子HSP70a/RBCS2的序列，序列4的第518位~第662位为增强子RBCS2 intron1的序列，序列4的第679位~第1248位为诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因的序列，序列4的第1255位~第1380位为HA的序列，序列4的第1400位~第1632位为终止子RBCS2的序列；所述HR-NAT的序列为将序列4的第1255位~第1380位去除得到的序列。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：C1）所述表达盒还包含如序列7所示的2A序列和目的基因，所述2A序列、目的基因与权利要求1-3中任一所述诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因共用启动子和终止子，且所述2A序列位于所述诺尔丝菌素- N -乙酰转移酶基因与目的基因之间。