[发明专利]一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白及其检测方法和其在肠道健康检测的用途在审
| 申请号： | 201910903795.X | 申请日： | 2019-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN110488025A | 公开（公告）日： | 2019-11-22 |
| 发明（设计）人： | 高平 | 申请（专利权）人： | 嘉兴行健生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N21/76 |
| 代理公司： | 33289 杭州裕阳联合专利代理有限公司 | 代理人： | 金方玮<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 314000 浙江省嘉兴市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 钙卫蛋白 抗体 氨基酸表位 氨基酸序列 免疫复合体 特异性结合 肠道健康 定量检测 肽链 检测 待测样本 化学发光 检测试剂 结合方式 抗体检测 复合物 灵敏度 人粪便 校准品 蛋白质 粪便 样本 复合 | ||
1.一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，包括：免疫复合体，磁珠化学发光检测体系，固定分离相为磁微粒；
免疫复合体包括：钙卫蛋白校准品，钙卫蛋白质控品，由标记后的第一特定抗体、标记后的第二特定抗体和待测样本复合后形成的“标记后的第一特定抗体—钙卫蛋白—标记后的第二特定抗体”的被标记的钙卫蛋白复合物抗体。
2.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，所述第一特定抗体，第二特定抗体与钙卫蛋白的结合方式为：一种抗体与钙卫蛋白S100A8肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合，另一种抗体与钙卫蛋白S100A9肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合。
3.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，所述第一特定抗体，第二特定抗体与钙卫蛋白的结合方式为：一种抗体与钙卫蛋白S100A8肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合，另一种抗体与钙卫蛋白S100A8肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合。
4.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，所述第一特定抗体，第二特定抗体与钙卫蛋白的结合方式为：一种抗体与钙卫蛋白S100A9肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合，另一种抗体与钙卫蛋白S100A9肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合。
5.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，所述固定分离相为链霉亲和素包被的磁微粒。
6.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，所述固定分离相为钙卫蛋白单克隆或多克隆抗体包被的磁微粒。
7.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，所述标记为发光标记物标记，所述发光标记物包括：吖啶酯，HRP，碱性磷酸酶或鲁米钠。
8.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白，其特征在于，所述第一特定抗体、第二特定抗体为多克隆抗体或单克隆抗体，所述单克隆抗体来源于小鼠、大鼠、兔的杂交瘤细胞，所述多克隆抗体来源于兔、羊、鸡。
9.一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白的检测方法，其特征在于，收集并萃取待测粪便样本，加入全自动化学发光仪的反应杯中，在每个反应杯中加入第一被标记的钙卫蛋白抗体、被包被的磁微粒溶液、第二被标记的钙卫蛋白抗体，在加入第二被标记的钙卫蛋白抗体前孵育、清洗，并在加入第二被标记的钙卫蛋白抗体后二次孵育、清洗，或在加入第二被标记的钙卫蛋白抗体后一次孵育、清洗，最后加入底物液或激发液对反应体系进行激发发光，依据已定标的校准曲线信息进行数据结果处理；
所述第一被标记的钙卫蛋白抗体、第二被标记的钙卫蛋白抗体为：一种抗体与钙卫蛋白S100A8或S100A9肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合，另一种抗体与钙卫蛋白S100A8或S100A9肽链氨基酸序列中的氨基酸表位特异性结合。
10.一种化学发光定量检测粪便钙卫蛋白在肠道健康检测的用途，其特征在于，用于检测肠道健康状况。
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