[发明专利]一种鱿鱼墨海洋微生物培养基的制备方法

权利要求书

1.一种鱿鱼墨海洋微生物培养基的制备方法，其特征在于：包括以下步骤为：

S1.配置缺少氮源、碳源的不完全培养基：加入MgSO₄，使其质量分数为0.01-0.04%，加入KH₂PO₄，使其质量分数为0.11-0.14%，加入牛肉膏，使其质量分数0.05%-0.1%，加入人工海水调配，使其质量分数为3-3.5%，用0.1mol/L的NaOH溶液调节混合液pH至7.0-7.4，高温灭菌得到灭菌完成的不完全培养基；

S2.培养基的制备：将鱿鱼墨与灭菌人工海水按照质量体积比1:60-90混合，调节pH至7.0-7.4，消毒，于超净工作台中将鱿鱼墨-海水混合液与步骤S1得到的不完全培养基、灭菌改性硅藻土混匀，得到鱿鱼墨海洋微生物培养基；

所述改性硅藻土为葛仙米糖蛋白/硅藻土复合材料；

所述改性硅藻土的制备方法为将葛仙米糖蛋白加入0.5wt%的木醋液溶液中溶解，搅拌后加入硅藻土，继续搅拌混合均匀，40℃烘干研细，得到改性硅藻土；

所述葛仙米糖蛋白的制备方法为将葛仙米干粉加入水中沸水提取1-2h，离心，浓缩至相对密度为2-2.5，加入75%的乙醇沉淀，得到黏性蛋白产物后加入混合有机溶剂，搅拌后静置24h，收集上清液，加入75%的乙醇沉淀，离心，收集沉淀，得到葛仙米糖蛋白。

2.根据权利要求1所述鱿鱼墨海洋微生物培养基的制备方法，其特征在于：所述葛仙米糖蛋白与木醋液的质量体积比为1：20-50，所述葛仙米糖蛋白与硅藻土的质量比为1:5-10。

3.根据权利要求1所述鱿鱼墨海洋微生物培养基的制备方法，其特征在于：所述搅拌混合为200-500r/min搅拌1h。

4.根据权利要求1所述鱿鱼墨海洋微生物培养基的制备方法，其特征在于：所述75%的乙醇与浓缩液的体积比为1：3-7；所述75%的乙醇与上清液的体积比为1：3-7；所述黏性蛋白产物与混合有机溶剂的质量体积比为1：5-10；所述沉淀温度为0-20℃；所述离心转速为5000-10000r/min，离心时间5min；所述混合有机溶剂为正丁醇、二氯甲烷和丙酮按照体积比1:1:1混合。

5.根据权利要求1所述鱿鱼墨海洋微生物培养基的制备方法，其特征在于：所述高温灭菌为115-125℃加热灭菌40min；所述消毒为72℃下消毒15s。

6.根据权利要求1所述鱿鱼墨海洋微生物培养基的制备方法，其特征在于：所述鱿鱼墨-海水混合液、不完全培养基和灭菌改性硅藻土的质量比为10:10:2-7。

7.一种如权利要求1-6任一所述制备方法制得的鱿鱼墨海洋微生物培养基。

8.一种如权利要求1-6任一所述制备方法制得的鱿鱼墨海洋微生物培养基在培养海洋微生物中的应用。