[发明专利]柴辛注射液中柴胡和细辛的质检方法

说明书

本发明公开了柴辛注射液中柴胡和细辛的质检方法，以正己醛作为柴胡的标记物，以甲基丁香酚作为细辛的标记物，采用气相色谱仪在同一色谱条件下分别对柴胡的标记物和细辛的标记物进行检测；具体包括正己醛的提取、甲基丁香酚的提取和正己醛的检测、甲基丁香酚的检测等步骤。本发明方法中以正己醛作为柴胡的标记成分，以甲基丁香酚作为细辛的标记成分，解决了正己酸响应值低、灵敏度差的问题。同时，本发明解决了甲基丁香酚峰拖尾严重、分离度差等问题。使用本发明的方法对柴辛注射液中柴胡和细辛的含量进行检测，结果准确可靠、操作便捷、且能够同时对这两种主要成分的含量进行检测，提高了检测效率。

技术领域

本发明涉及药物检测领域，特别是涉及一种对柴辛注射液中的柴胡和细辛含量检测的方法。

背景技术

柴辛注射液是以柴胡和细辛为主要成分，经水提等步骤制得的注射液；其功能为解表退热，祛风散寒，主要用于治疗马、牛、羊、猪、犬、猫等的感冒发热，其生产企业众多，临床应用广泛。在产品的质量监督过程中，需要定期对不同批次注射液产品中的柴胡含量和细辛含量进行质量检测(简称质检)，以判断产品是否符合标准。

目前，《柴辛注射液质量标准》(收载于中华人民共和国农业农村部公告第1759号第24页-25页)中对柴辛注射液中柴胡和细辛的质检方法具体为：采用气相色谱，色谱柱选用DB-624，取柴辛注射液直接进样，以正己酸作为柴胡的标记物(对照品溶液为含35μg/ml正己酸的丙酮溶液)，检测柴胡的含量；以甲基丁香酚作为细辛的标记物，提取后对细辛的含量进行测定。

以上方法中以正己酸作为柴胡的标记物，正己酸的峰面积仅为10左右，然而在该色谱条件下，通常峰面积应不小于50，才能对色谱峰进行观察和计算；由于正己酸作为标记物的峰面积太小，即响应值较低，导致检测时灵敏度较差，容易出现“假阴性”的结果，使得检测结果准确性低。为了解决响应值较低的问题，常规操作是用FFAP色谱柱替换DB-624色谱柱。替换后虽然35μg/ml的正己酸丙酮溶液的峰面积能达到60左右，但由于柴辛注射液是水溶液且直接进样，会对FFAP色谱柱的固定相造成不可逆的损伤，以至于连续进样五次后，FFAP色谱柱的固定相就会损伤严重，其检测限由5μg/ml升高至30μg/ml，即色谱柱的灵敏度快速下降，无法准确鉴别供试品中正己酸的含量，也导致结果准确性低。

另外，按上述方法检测甲基丁香酚时，得到的对照品溶液和样品溶液的色谱图如图1A和图1B所示。根据图1A和图1B可知，无论是在对照品溶液色谱图(图1A)中，还是样品溶液色谱图(图1B)中，甲基丁香酚的峰(保留时间分别为2.577min和2.578min)均拖尾严重，峰型不尖锐、左右不对称、即峰型较差，且甲基丁香酚的峰与内标物正二十烷的峰及其他相邻杂质峰的距离近，峰面积有重叠，分离度很差。以上色谱图表明，现有标准中的测定方法用来评价柴辛注射液产品质量可操作性差，且由于测定方法的准确性低，使得其用于控制产品质量难度大，容易造成产品质量的不稳定。

因此，尽快探索出一种能够准确、简便、且同时检测柴辛注射液中的柴胡和细辛含量的方法成为本领域技术人员需要攻克的难题。

发明内容

本发明的主要目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，提供一种操作简便、结果准确可靠且能够定量检测柴辛注射液中柴胡和细辛的含量方法。为实现本发明的目的所采用的技术方案是：

柴辛注射液中柴胡和细辛的质检方法，以正己醛作为柴胡的标记物，以甲基丁香酚作为细辛的标记物，采用气相色谱仪在同一色谱条件下分别对柴胡的标记物和细辛的标记物进行检测；具体包括正己醛的提取、甲基丁香酚的提取和正己醛的检测、甲基丁香酚的检测等步骤。质检标准为：若柴辛注射液中正己醛含量不少于1.8μg/ml，且甲基丁香酚含量不少于40μg/ml，则产品合格，否则不合格。

所述正己醛的提取具体为：向1倍体积的待测柴辛注射液样品中加入1-3倍体积的正己烷，振摇，待分层后，取上层溶液作为检测正己醛的样品溶液。

所述振摇时间为2-10分钟。