[发明专利]一种用于抑制腐败希瓦氏菌的抗菌剂及其制备方法和在南美白对虾保鲜剂制备中的应用

权利要求书

1.一种用于抑制腐败希瓦氏菌的抗菌剂，其特征在于该抗菌剂为费菜总黄酮，所述的费菜总黄酮主要含有槲皮甙和没食子酸，还含有少量的山奈酚、槲皮素和异槲皮苷，其中槲皮甙的含量为35-50%总重量，没食子酸的含量为30-40%总重量。

2.一种根据权利要求1所述的用于抑制腐败希瓦氏菌的抗菌剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）采用乙醇超声波辅助提取法得提取液；

（2）将步骤（1）所得提取液浓缩，并添加无水乙醇；

（3）将步骤（2）所得溶液低温处理后，取上清液；

（4）将步骤（3）所得上清液浓缩，并采用大孔树脂法吸附，弃上清液，再用乙醇溶液解析，取上清液；

（5）将步骤（4）所得上清液浓缩，得到费菜总黄酮提取物，经冷冻干燥为成品。

3.根据权利要求2所述的一种用于抑制腐败希瓦氏菌的抗菌剂的制备方法，其特征在于具体步骤如下：

（1）取经烘干粉碎过60目筛的费菜粉1000 g，加入40 L 70%乙醇溶液，匀浆，超声波辅助提取，超声时间为60 min，超声温度为60 ℃，然后浸提2 h，浸提温度为60 ℃，过滤取上清液；

（2）将步骤（1）所得上清液进行减压浓缩，回收溶剂，加热温度为45-50℃，浓缩完毕后加浓缩液两倍体积的无水乙醇；

（3）将步骤（2）所得溶液，于4℃低温处理24 h，过滤，去沉淀，取上清液；

（4）将步骤（3）所得上清液进行减压浓缩，回收溶剂，加热温度为45-50℃；将浓缩液加入到20%乙醇溶液中将其稀释为黄酮浓度为2.5 mg/mL的费菜提取溶液，然后加入经酸、碱和醇处理至完全溶胀的大孔树脂静态吸附24 h后，过滤弃滤液，加入与20%乙醇溶液相同体积的80%乙醇溶液进行解析，解析完毕后，过滤取上清液，其中费菜提取溶液与大孔树脂比例为10mL：1g；

（5）将步骤（4）所得上清液进行减压浓缩，回收溶剂，加热温度为45-50℃，得到的浓缩液，即为费菜总黄酮，冷冻干燥后备用。

4.一种根据权利要求3所述的用于抑制腐败希瓦氏菌的抗菌剂的检测方法，其特征在于具体步骤如下：将权利要求3制备得到的费菜总黄酮，用甲醇溶解经冷冻干燥后的费菜总黄酮粉末，经0.22 μm滤膜过滤，作为样品溶液，采用超高效液相色谱-电喷雾质谱法检测费菜总黄酮的成分：色谱柱为Angilent Zorbax XDB-C18柱，流动相A相为甲醇和B 相为0.1%甲酸溶液，流速为0.8 mL/min，进样量为10 μL，柱温25℃，检测波长为254 nm，线性梯度洗脱程序为：0-5 min，70%-30% A；5-18 min，30%-10% A；离子源：ESI；扫描范围：100~1200 m/z；毛细管电压：2.50 KV；锥孔电压：50.00 V；锥孔气流量：50 L/h；提取电压：2.00V；离子源温度：125℃；脱溶剂气温度：250℃；脱溶剂气流量：400 L/h。

5.一种权利要求1所述的用于抑制腐败希瓦氏菌的抗菌剂在南美白对虾保鲜剂制备中的应用。

6.根据权利要求5所述的一种用于抑制腐败希瓦氏菌的抗菌剂在南美白对虾保鲜剂制备中的应用，其特征在于：所述的南美白对虾保鲜剂由以下原料及其重量份数组成：费菜总黄酮 4 份、蓝莓叶多酚 2 份、N-乙酰-L-半胱氨酸 3.2 份和水1000份。