[发明专利]鉴定鸡细小病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组及其应用在审
| 申请号： | 201910920172.3 | 申请日： | 2019-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN110592281A | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 谢芝勋;张艳芳;邓显文;刘加波;谢志勤;张民秀;谢丽基;罗思思;曾婷婷 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
| 代理公司： | 45104 广西南宁公平知识产权代理有限公司 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530001 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 鸡传染性贫血病毒 细小病毒 混合感染 碱基序列 减少污染 快速检测 二重PCR 试剂盒 引物组 检测 可用 节约 | ||
1.鉴定鸡细小病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组，其特征在于包括引物对Ⅰ和引物对Ⅱ，引物对Ⅰ由引物ChPV-F和ChPV-R组成，引物对Ⅱ由引物CIAV-F和CIAV-R组成；所述引物ChPV-F、ChPV-R、CIAV-F和CIAV-R分别具有序列表SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.4的碱基序列。
2.根据权利要求1所述的鉴定鸡细小病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组，其特征在于：所述引物ChPV-F、ChPV-R、CIAV-F和CIAV-R的摩尔比为3:3:2:2。
3.权利要求1所述引物组在PCR扩增中的应用，其特征在于退火温度为56.1℃。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述PCR扩增的反应体系和反应程序分别为：反应程序：95℃预变性5min；95℃1min，56.1℃1min，72℃1min，进行35个循环；72℃延伸10min；
反应体系：2×PCR Mix 12.5μL，其中ChPV-F、ChPV-R各1μL，CIAV-F、CIAV-R各1μL，模板2.0μL，ddH2O补足至25.0μL；所述引物的浓度分别为：0.6pmol/μL ChPV-F、0.6pmol/μLChPV-R、0.4pmol/μL CIAV-F、0.4pmol/μL CIAV-R。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述模板来自待测样本中的病毒DNA、病毒cDNA。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述待测样本为鸡病料。
7.权利要求1所述引物组在制备鉴定鸡细小病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒中的应用。
8.鉴定鸡细小病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒，其特征在于含有用于检测的引物组；所述引物组包括引物对Ⅰ和引物对Ⅱ，引物对Ⅰ由引物ChPV-F和ChPV-R组成，引物对Ⅱ由引物CIAV-F和CIAV-R组成；所述引物ChPV-F、ChPV-R、CIAV-F和CIAV-R分别具有序列表SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.4的碱基序列。
9.根据权利要求8所述的鉴定鸡细小病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒，其特征在于：所述引物ChPV-F、ChPV-R、CIAV-F和CIAV-R分别单独包装。
10.根据权利要求4所述的鉴定鸡细小病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒，其特征在于：所述引物ChPV-F、ChPV-R、CIAV-F和CIAV-R的摩尔比为3:3:2:2。
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