[发明专利]一种玉露细胞防褐化培养方法

权利要求书

1.一种玉露细胞防褐化培养方法，其特征在于，其包括下述步骤：

将玉露细胞培养物接种到无菌三角瓶内；

在三角瓶内加入培养液；

无菌三角瓶放在摇床上进行增殖悬浮培养；

取步骤C所得的玉露细胞培养物的滤液，加入培养液，接种到无菌三角瓶内；

无菌三角瓶放在摇床上进行防褐化悬浮培养。

2.如权利要求1所述的玉露细胞防褐化培养方法，其特征在于，所述步骤A中的玉露细胞培养物为未褐化玉露细胞培养物，所述三角瓶容积150ml。

3.如权利要求2所述的玉露细胞防褐化培养方法，其特征在于，所述步骤B中的培养液取40ml，以冰川水为溶剂，所述培养液配方为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L。

4.如权利要求3所述的玉露细胞防褐化培养方法，其特征在于，所述冰川水中包含SiO32- 0.5-5.0mg/L、HCO3- 60.0-100.0mg/L、Sr+ 0.2-0.5 mg/L和Ba2+ 0.001-0.01mg/L，所述冰川水中氘含量＜150ppm；

所述冰川水中SiO32^-的含量优选为1.0-3.0mg/L；

所述冰川水中HCO3^-的含量优选为75.0-85.0mg/L；

所述冰川水中Sr⁺的含量优选为0.2-0.4mg/L；

所述冰川水中Ba2⁺的含量优选为0.004-0.006mg/L；

所述冰川水中氘含量优选为133-137ppm；

优选地，所述冰川水中还含有SO42-、Cl-、Ca2+、Mg2+、K+和Na+中的一种或多种；所述冰川水中SO42-的含量优选为14.0-30.0 mg/L，更优选为20.0-25.0mg/L，例如22.2mg/L；所述冰川水中Cl-的含量优选为0.50-2.0mg/L，更优选为0.50-1.0mg/L，例如0.68mg/L；所述冰川水中Ca2+的含量优选为14.0-30.0 mg/L，更优选为20-25mg/L，例如22.2mg/L；所述冰川水中Mg2+的含量优选为2.0-10.0 mg/L，更优选为2.0-5.0mg/L，例如4.5mg/L；所述冰川水中K+的含量优选为0.5-10.0 mg/L，更优选为0.5-5mg/L，例如2.0mg/L；所述冰川水中Na+的含量优选为0.5-5.0 mg/L，更优选为0.5-1.5 mg/L，例如0.99mg/L；

优选地，所述冰川水中溶解性总固体的含量为60-150 mg/L，更优选为90-110 mg/L，例如98 mg/L；

优选地，所述冰川水含有如下成分：溶解性总固体60-150 mg/L、SiO3^2- 0.5-5.0mg/L、碳酸氢盐 60.0-100.0mg/L、硫酸盐 14.0-30.0 mg/L、氯化物 0.50-2.0mg/L、钙 14.0-30.0 mg/L、镁 2.0-10.0 mg/L、钾 0.5-10.0mg/L、钠 0.5-5.0 mg/L、锶 0.2-0.5mg/L、钡0.001-0.01mg/L；更优选地，所述冰川水含有如下成分：溶解性总固体90-110 mg/L（180℃）、SiO32- 1.0-3.0mg/L、碳酸氢盐 75.0-85.0mg/L、硫酸盐 20.0-25.0 mg/L、氯化物0.50-1.0mg/L、钙 20-25mg/L、镁 2.0-5.0mg/L、钾 0.5-5mg/L、钠 0.5-1.5 mg/L、锶 0.2-0.4mg/L、钡 0.004-0.006mg/L；最优选地，所述冰川水含有的成分如下所示：

成分	-1)]]>
溶解性总固体(180℃)	98
硅酸盐	3.0
碳酸氢盐	82.1
硫酸盐	22.2
氯化物	0.68
钙	22.2
镁	4.5
钾	2.0
钠	0.99
锶	0.30
钡	0.005
硝酸盐	＜0.001
铁	＜0.001
锰	＜0.001
硒	＜0.0001
铜	＜0.001
氘	133ppm

所述冰川水的pH为7.1-7.9，优选为7.4；

和/或，所述冰川水的电导率为250-300 μS/cm，优选为288 μS/cm；

和/或，所述冰川水的水源地为喜马拉雅山，例如喜马拉雅山脉中段北坡；所述冰川水的取水口优选为日喀则岗巴县曲登尼玛冰川；

和/或，所述冰川水作为所述细梗蔷薇愈伤组织防褐化培养基中的唯一溶剂。