[发明专利]一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建及其应用

权利要求书

1.一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建，其特征在于，所构建的模型用于SS9感染的典型临床症状及病理变化，该模型还用于开展SS9致病性、感染机制及疫苗和药物开发及评估研究工作，其中构建的步骤：

S1、接种动物准备：选取4-6周龄豚鼠，分为正常对照组(n＝6)、PBS对照组(n＝6)与6个实验组(n＝6)，并在相同环境下按照分组隔离饲养5-7d；

S2、菌液制备：使用稀释液对猪链球菌9型菌进行稀释，分别配置六组不同浓度的猪链球菌9型菌液；

S3、动物接种：将S1步骤中的正常对照组不做处理，PBS对照组通过腹腔注射1mL的PBS缓冲液，6个实验组分别通过腹腔注射S2步骤中制备的不同梯度浓度的猪链球菌9型菌液1mL；

S4、临床动物观察：对步骤S3中各组豚鼠在相同环境进行隔离饲养，期间进行正常的水、食喂养，观察1周豚鼠的发病及死亡率情况；

S5、对死亡豚鼠进行解剖，取脑、心、肝、脾和肺组织进行细菌分离鉴定和各个器官中细菌分布及载量测定；

S6、对分离到的细菌通过猪链球菌谷氨酸脱氢酶基因和荚膜多糖基因PCR方法进行SS9鉴定并测序；

S7、对各组豚鼠进行解剖，对其的脑、心、肝、脾和肺进行组织病理切片鉴定。

2.根据权利要求1所述的一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建，其特征在于：所述S1步骤中各组豚鼠长度和体重应选取相当，并模拟生态环境进行饲养。

3.根据权利要求1所述的一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建，其特征在于：所述S2步骤中的稀释液设置为PBS缓冲液。

4.根据权利要求1所述的一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建，其特征在于：所述S2步骤中六组猪链球菌9型菌液的浓度分别设置为5.0×108CFU/mL、1.0×109CFU/mL、2.0×109CFU/mL、3.0×109CFU/mL、4.0×109CFU/mL和5.0×109CFU/mL。

5.根据权利要求1所述的一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建，其特征在于：所述S4步骤中需定期测量各组豚鼠的体温变化，及记录体重变化和体温变化。

6.根据权利要求1所述的一种猪链球菌9型感染豚鼠动物模型的构建，其特征在于：所述S7步骤中的组织病理切片鉴定步骤为：取0.5cm*0.5cm*1cm的组织块→使用100mL/L浓度的福尔马林固定→经酒精脱水→石蜡包埋→切片→贴片→HE染色→镜检。