[发明专利]一种PNCK基因的PCR检测试剂盒及应用在审
申请号: | 201910922715.5 | 申请日: | 2019-09-27 |
公开(公告)号: | CN110656176A | 公开(公告)日: | 2020-01-07 |
发明(设计)人: | 林爱福;桑凌杰;刘广平 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;G01N33/574;C12N15/11 |
代理公司: | 33201 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 试剂盒 检测引物 筛查 随机性 基因转录水平 统计学意义 蛋白抗体 发明试剂 方式检测 基因检测 临床应用 内参引物 特异性强 准确度 灵敏度 灵敏性 检测 引物 样本 蛋白 基因 应用 | ||
1.一种PNCK基因的PCR检测试剂盒,其特征在于所述试剂盒包括PNCK基因检测引物、内参引物;
所述检测引物为PNCK#1、PNCK#2或PNCK F#3中的一组:
PNCK F#1:5’-CTCAAGCCCGAAAACCTCCT-3’;
PNCK R#1:5’-CAGAAGGTGCCGGATGAAGT-3’;
PNCK F#2:5’-GCTCTTGGAGCAGAAACCCT-3’;
PNCK R#2:5’-TCATAGCTGGCCCTCAGGAT-3’;
PNCK F#3:5’-AGCTCTTGGAGCAGAAACCC-3’;
PNCK R#3:5’-CTGTTGGCAGGTGAACCTCT-3’;
内参引物B2M F:5’-AGA TGA GTA TGC CTG CCG TG-3’;B2M R:5’-TCA TCC AAT CCAAAT GCG GC-3’。
2.如权利要求1所述试剂盒,其特征在于所述试剂盒还包括PCR反应液。
3.一种权利要求1所述PNCK基因的PCR检测试剂盒的检测方法,其特征在于所述方法为:以待测样品RNA为模板,使用试剂盒中检测引物与内参引物进行RT-qPCR反应,以正常样品为对照,按照2^(ΔΔCq)计算相对丰度,若统计学显著,则待测样品PNCK基因处于异常激活态。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述试剂盒还包括用于PNCK蛋白检测的抗体和内参蛋白抗体,所述抗体为PNCK蛋白抗体,所述内参蛋白抗体为Vinculin蛋白抗体。
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