[发明专利]一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法

权利要求书

1.一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)电极预处理：将电极的峰电压调整为60～80mV，保存在去离子水中备用；

(2)甲萘醌印迹电极的制备：将步骤(1)中经过预处理后的电极置于含有丙烯酸功能单体、模板分子甲萘醌的缓冲液中，用电化学聚合法聚合电极，得到修饰电极甲萘醌/GCE电极，再用甲醇和乙酸的混合溶液洗涤除去模板分子甲萘醌，得到甲萘醌印迹电极；

(3)血液样品处理：将待测血样置于含有抗凝剂的容器中，离心后取上清液得到血浆；

(4)检测维生素的含量：将所述血浆倒入中性缓冲溶液中，用所述甲萘醌印迹电极作为工作电极，用电化学检测方法检测维生素K1、K2或K3的含量。

2.根据权利要求1所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述电极在调整峰电压之前先打磨成镜面，然后再进行超声波清洗，所述电极为玻碳电极。

3.根据权利要求2所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，所述打磨时采用氧化铝麂皮进行打磨。

4.根据权利要求2所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，所述超声波清洗的方法为：分别用二次蒸馏水、HNO₃、无水乙醇和二次蒸馏水作溶剂依次进行超声清洗。

5.根据权利要求1所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述峰电压调整的方法如下：将所述电极在含有1.0mmol/L亚铁氰化钾、0.8mmol/L铁氰化钾和0.4mol/L氯化钾的混合溶液中进行循环扫描，扫描结束后取出清洗干净即可得到峰电压为60～80mV的电极；所述扫描的速度为45～50mV/s，所述扫描的电位区间是-0.2～1.6V，所述扫描时间为60s。

6.根据权利要求1所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，步骤(2)中所述缓冲液中丙烯酸的摩尔体积浓度为1.0～2.0mmol/mL，所述缓冲液中甲萘醌的摩尔体积浓度为0.22～0.35mmol/mL；所述缓冲溶液中不含有磷和镁元素。

7.根据权利要求1所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，步骤(2)中所述电化学聚合法具体为：用循环伏安法扫描20～30圈，扫描范围为0～1.4V，扫速为50mV/s。

8.根据权利要求1所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，步骤(2)中所述混合溶液中甲醇与乙醇的体积比为6～9:1～3，所述洗涤时间为12～48h。

9.根据权利要求1所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，步骤(4)中所述检测时利用已知标准维生素K1、K2、K3的含量的血液为样品，确定各维生素K1、K2、K3的特征氧化峰；然后针对每种维生素，分别制作维生素K1、K2、K3氧化峰电流和浓度的校准曲线，得到血液中维生素K1、K2、K3的含量。

10.根据权利要求1所述一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，其特征在于，步骤(4)中所述检测时的条件为：

将所述缓冲溶液的pH调至4.0～4.3，检测得到维生素K1的含量；

将所述缓冲溶液的PH调至4.3～4.6，检测得到维生素K2的含量；

将所述缓冲溶液的PH调至1.7～1.85，检得到测维生素K3的含量。