[发明专利]一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法

说明书

本发明涉及一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，属于维生素检测领域。采用人工合成的维生素K3与维生素K1和K2的头部基团相同的特点，通过人工合成化合物甲萘醌(维生素K3)，再以甲萘醌(维生素K3)为模板制作成MIPs连接到GCE电极上，用于伏安法中可以同时对维生素K1、K2、K3进行检测，并且该检测方法具有成本较低、灵敏度高，测量误差低等特点，解决了因为维生素K1和K2天然结构复杂、脂肪族侧链长的特点导致的难以合成分子印迹材料的问题，对直接检测血液中维生素K1、K2、K3具有重要意义。

技术领域

本发明属于维生素检测领域，具体涉及一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法。

背景技术

健康人对维生素K的需要量低而膳食中含量比较多，原发性维生素K缺乏不常见，临床上能见到的由于维生素K缺乏所致的表现是继发性出血如伤口出血，大片皮下出血和中枢神经系统出血等。胎盘转运维生素K量少，新生儿初生时体内储存量低及体内肠道的无菌状态阻碍了利用维生素K，母乳中维生素K含量低，新生儿吸乳量少以及婴儿未成熟的肝脏还不能合成正常数量的凝血因子等原因，使新生儿、小婴儿普遍存在低凝血酶原症。已知最常见的成人维生素K缺乏性出血多发生于摄入含维生素K低的膳食并服用抗生素的病人中，维生素K不足可见于吸收不良综合征和其它胃肠疾病如囊性纤维化、口炎性腹泻、溃疡性结肠炎、节段性小肠炎、短肠综合征、胆道梗阻、胰腺功能不全等，以上情况均需常规补充维生素K制剂。即使进食大量富含天然维生素K1的膳食也未发现有产生毒性反应者，但服用超过药理剂量的维生素K2能导致新生儿溶血性贫血、高胆红素血症和肝中毒，在成人则可诱发心脏病和肺病。因此需要对维生素进行检测。

由于维生素K1和K2存在着天然结构复杂、脂肪族侧链长的特点，所以合成相应的维生素K1和K2的分子印记材料较为困难，但是人工合成的维生素K3与维生素K1和K2的头部基团相同，且无复杂化的长脂肪族侧链。

因此本发明采用虚拟印迹法，通过人工合成化合物甲萘醌(维生素K3)，以甲萘醌(维生素K3)为模板制作成MIPs连接到GCE电极上，用伏安法同时对维生素K1、K2、K3进行检测。该方法成本较低，提高了灵敏度，降低了测量误差，对直接检测血液中维生素K1、K2、K3具有重要意义

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种基于分子印迹材料的维生素电化学检测方法，所述方法包括如下步骤：所述方法包括以下步骤：

(1)电极预处理：将电极的峰电压调整为60～80mV，保存在去离子水中备用；

(2)甲萘醌印迹电极的制备：将步骤(1)中经过预处理后的电极置于含有丙烯酸功能单体、模板分子甲萘醌的缓冲液中，用电化学聚合法聚合电极，得到修饰电极甲萘醌/GCE电极，再用甲醇和乙酸的混合溶液洗涤除去模板分子甲萘醌，得到甲萘醌印迹电极(MIPs/GCE)；

(3)血液样品处理：将待测血样置于含有抗凝剂的容器中，离心后取上清液得到血浆；

(4)检测维生素的含量：将所述血浆倒入中性缓冲溶液中，用所述甲萘醌印迹电极(MIPs/GCE)电极作为工作电极，用电化学检测方法检测维生素K1、K2或K3的含量。

优选的，步骤(1)中所述电极在调整峰电压之前先打磨成镜面，然后再进行超声波清洗。

优选的，所述电极为玻碳电极。

优选的，所述打磨时采用氧化铝麂皮进行打磨。

优选的，所述超声波清洗的方法为：分别用二次蒸馏水、HNO₃、无水乙醇和二次蒸馏水作溶剂依次进行超声清洗。