[发明专利]一组用单管检测人运动神经元基因的引物及试剂盒

权利要求书

1.一组用单管检测人运动神经元基因的引物，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO.1～8所示。

2.权利要求1所述的引物在制备检测人运动神经元基因的试剂盒中的应用。

3.一个单管检测人运动神经元基因的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还含有PCR 反应混合液、引物混合液、PCR酶混合液、SMN校准品、SMN质控品、ROX Size以及稀释液。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，权利要求1所述的引物以引物混合液的形式存在，引物混合液中各引物按照10×工作浓度进行储存，SEQ ID NO.1～2所示引物的工作浓度为0.2～0.3μmol/L，SEQ ID NO. 3～4所示引物的工作浓度为0.02～0.1μmol/L，SEQ ID NO.5～8所示引物的工作浓度为0.05～0.1μmol/L。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，PCR反应混合液按照5×工作浓度进行储存，包括Tris-Hcl缓冲液、氯化钾、硫酸铵、小牛血清蛋白、明胶、吐温-20以及二硫苏糖醇、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP，其工作浓度依次为10～50mmol/L、20～45mmol/L、16.6 mmol/L、100μg/mL、0.01%、0.05%～01%、5 mmol/L、200nM、200nM、200nM、100nM、200nM。

7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，PCR酶混合液包括TaqHs聚合酶和UDG酶，其工作酶活性比例配比为TaqHs聚合酶:UDG酶的范围=10：1～5：1。

8.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，其SMN校准品为SMN1和SMN2的第7号外显子以及内参基因的拷贝数均为2的正常人样本基因组DNA，其工作浓度为10ng/μL，上样量范围为20ng～50ng，用于均一化待检样本的检测峰。

9.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，SMN质控品为SMN1基因的第7号外显子拷贝数≤1，且SMN2基因的第7号外显子拷贝数≥1的人基因组DNA。