[发明专利]一种提高万古霉素产生菌生产万古霉素的方法在审
| 申请号： | 201910953854.4 | 申请日： | 2019-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN110643626A | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 钱秀萍;陈俞婕;魏维;夏兴;戈梅 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学;上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/31;C12P21/02;C12R1/01 |
| 代理公司： | 31104 上海华工专利事务所(普通合伙) | 代理人： | 赵孟琴;缪利明 |
| 地址： | 200030 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 万古霉素 生物合成调节 基因过表达 重组菌株 转入 质粒 感受态细胞 大肠杆菌 工业应用 基因序列 去甲基化 生产菌株 重组载体 基因 产生菌 富集 构建 生产 应用 克隆 | ||
1.一种提高万古霉素产生菌生产万古霉素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一、克隆生物合成调节基因AORI_1475至载体，并转入感受态细胞培养富集；
步骤二、构建包含AORI_1475基因序列的质粒，并转入大肠杆菌JM110去甲基化并过表达；
步骤三、提取步骤二中所述过表达的质粒，转入万古霉素生产菌株，获得AORI_1475基因过表达的重组菌株。
2.如权利要求1所述的提高万古霉素产生菌生产万古霉素的方法，其特征在于，所述步骤一的生物合成调节基因AORI_1475以东方拟无枝酸菌HCCB10007基因组为模板，分别用如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物通过PCR调取AORI_1475片段的方式获得。
3.如权利要求1所述的提高万古霉素产生菌生产万古霉素的方法，其特征在于，所述生物合成调节基因AORI_1475上调vanH基因的表达。
4.如权利要求3所述的提高万古霉素产生菌生产万古霉素的方法，其特征在于，生物合成调节基因AORI_1475上调vanH基因的表达的步骤为：将所述生物合成调节基因AORI_1475连接载体并导入万古霉素生产菌株中。
5.一种生物合成调节基因AORI_1475用于生产万古霉素的应用。
6.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求1所述的生物合成调节基因AORI_1475。
7.一种AORI_1475基因过表达的重组菌株用于生产万古霉素的应用。
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