[发明专利]一种真姬菇液体菌种生产工艺

权利要求书

1.一种真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：包括如下步骤：

(1)平皿菌种培养：将培养基装入干净的三角瓶中，用硅胶塞塞好，包好称量后与平皿一起放入灭菌锅中灭菌；当灭菌结束后，拿出三角瓶、平皿一起摆入超净工作台内灭菌；将三角瓶内培养基分装入平皿中，封口密封，烘干后待用；挑选优质的试管种，用接种针刮去试管前端1cm处的薄弱菌丝及趴壁菌丝，选用前端及后端偏上一段的部分切割成3*3mm大小均匀的小块，勾去一块接入备用的平皿中，接种完成后放入生化培养箱中培养得到平皿菌种；

(2)三角瓶液体菌种培养：配制三角瓶培养基，灭菌冷却，选取步骤(1)得到的平皿菌种，将生长在前端菌丝分隔成大小均匀的正方形小块，用接种铲削取薄薄的正方形小块，转接入摇瓶内，将接种好的摇瓶放培养室中进行动态培养，得到三角瓶液体菌种；

(3)发酵罐菌种培养：配制发酵罐培养基，灭菌冷却，挑选步骤(2)得到的三角瓶液体菌种进行接种，将接种好的发酵罐通入无菌空气，设定温度为20～24℃，罐压0.03～0.05MPa，进行深层发酵培养；

(4)取样检测：灭菌后立刻取样，取到空瓶内后转接到PDA培养基上进行检测，30～33℃条件下培养24小时后没有任何异常现象即为合格真姬菇液体菌种。

2.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(1)所述灭菌锅灭菌为120～123℃灭菌20～40min。

3.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(1)所述生化培养箱温度为22～23℃。

4.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(2)所述三角瓶培养基包括如下重量比百分比的原料：豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.05％，余量为水。

5.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(2)所述动态培养条件为：前7天转速调到600r/min，最后1天转速调为800r/min，培养温度为22～23℃。

6.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(3)所述发酵罐培养基包括如下重量比百分比的原料：豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，消泡剂0.15％，余量为水。

7.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(3)所述灭菌为110℃保持20min，115℃保持30min，123℃保持90min。

8.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(3)所述无菌空气在出菌丝前的通入量为发酵罐体积的30-50％；所述无菌空气在出菌丝后的通入量为发酵罐体积的50-80％。

9.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(4)所述取样工艺流程包括如下步骤：将取样瓶用75％酒精浸湿棉塞，然后用0.25％新洁尔灭溶液在处理一次，20min后两人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处。