[发明专利]扁蓄苷的用途以及从珠芽蓼中提取扁蓄苷的方法有效
申请号: | 201910957874.9 | 申请日: | 2019-10-10 |
公开(公告)号: | CN111150739B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 钱正明;甄达明;谭国英;何焯斌;李春红 | 申请(专利权)人: | 东莞市东阳光冬虫夏草研发有限公司;西藏林芝高原雪都冬虫夏草有限公司 |
主分类号: | A61K31/7048 | 分类号: | A61K31/7048;C07H17/07;C07H1/08;A61P35/00 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖阳 |
地址: | 523871 广东省东莞市长*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 扁蓄 用途 以及 珠芽 提取 方法 | ||
1.一种从珠芽蓼中提取扁蓄苷的方法,其特征在于,包括:
利用乙醇对珠芽蓼进行回流提取,获得珠芽蓼提取物;
利用乙醇-水体系对所述珠芽蓼提取物进行第一分离,获得第一分离部分;
利用甲醇-氯仿体系对所述第一分离部分进行第二分离,获得第二分离部分;
利用甲醇-水体系对所述第二分离部分进行第三分离,获得第三分离部分;
利用乙腈-水体系对所述第三分离部分进行第四分离,以便获得所述扁蓄苷;
其中,所述第一分离中,依次利用纯水、5%乙醇、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇和80%乙醇对所述珠芽蓼提取物进行梯度洗脱,合并30%~70%乙醇洗脱液为所述第一分离部分;
所述第一分离中,梯度洗脱条件为:
所述第一分离是利用D101大孔树脂柱进行的;
所述甲醇-氯仿体系中,所述甲醇的浓度为15%;
所述第二分离中,洗脱流速为1.0~1.5 BV/h,洗脱体积为5~9 BV;
所述第二分离是利用100~200目硅胶柱进行的;
所述甲醇-水体系中,所述甲醇的浓度为50%;
所述第三分离中,洗脱流速为0.6~0.8 mL/min,洗脱体积为7450~7500 mL,合并第58~72 h的洗脱液为所述第三分离部分;
所述第三分离是利用Sephadex LH-20凝胶柱进行的;
所述第四分离中,利用乙腈-水体系对所述第三分离部分进行梯度洗脱,其中,所述乙腈-水体系中,所述乙腈的浓度为19~85%;
所述第四分离中,梯度洗脱条件为:
其中,流动相A为水,流动相B为乙腈,保留时间为17.6 min的流分中包含所述扁蓄苷;
所述流动相A中添加有甲酸,所述甲酸在所述流动相A中的浓度为0.1%;
所述第四分离是利用高效液相Agilent ZORBAX SB-C18半制备色谱柱进行的;
所述第四分离中,梯度洗脱的流速为3 mL/min,检测波长为254/275/360 nm;
所述回流提取中,所述珠芽蓼茎叶与所述乙醇的料液比为1:15~1:30 kg/mL;
所述回流提取中,所述乙醇的浓度为70%;
所述回流提取的时间为3-4小时;
将回流提取液浓缩至无醇状态,并利用石油醚将回流提取浓缩液进行洗涤处理,以便获得珠芽蓼提取物。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,
所述第一分离中,梯度洗脱条件为:
。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第二分离中,洗脱流速为1.2 BV/h,洗脱体积为7 BV。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,进一步包括:将甲醇-氯仿体系洗脱液浓缩至干,甲醇复溶,并用孔径为0.4~0.5μm的滤膜过滤,滤液为所述第二分离部分。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第三分离中,洗脱流速为0.73 mL/min,共洗脱935管,每管8 mL,合并第335~385管洗脱液为所述第三分离部分。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,进一步包括:将甲醇-水体系洗脱液浓缩,并用孔径为0.4~0.5 μm的滤膜过滤,滤液为所述第三分离部分。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述洗涤处理中,所述回流提取浓缩液与所述石油醚的体积比为1:1。
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